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- Xkbio
- XK-SJH-A270
- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Superoxide anion scavenging capacity test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
超氧阴离子清除能力试剂盒
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
测定原理
AP-TEMED 系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成 NO2－，NO2－与对氨基ben磺酸和 α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在 530nm 处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。自备实验用品及仪器
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 1.5mL×1 支，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 6mL 蒸馏水充分溶解。试剂三：液体 7.5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 7.5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂五：液体 7.5mL×1 瓶，4℃避光保存。样品处理
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL
提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，
总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
- 培养液或其它液体：直接检测。
- 粉剂药物可配制成相同浓度，比如 1mg/mL。
测定操作
| 对照管 | 测定管 | |
| 试剂一（μL） | 10 | 10 |
| 试剂二（μL） | 40 | 40 |
| H2O（μL） | 25 | |
| 充分混匀，25℃反应 1min | ||
| 样品（μL） | 25 | |
| 试剂三（μL） | 50 | 50 |
| 充分混匀，37℃反应 30min | ||
| 试剂四（μL） | 50 | 50 |
| 试剂五（μL） | 50 | 50 |
| 充分混匀，37℃显色 20min，于微量石英比色皿/96 孔板，在 530nm 处测定对 照管和测定管的吸光值，分别记为A 对照管和A 测定管。 |
||
相关图片：
计算公式
A对照管
注意事项
- 试剂一 4℃可保存 2 个月，配制好的试剂二 4℃可保存一周，建议实验前配制，并尽快使用。
- 样品处理完后立即进行测定，或者低温保存不超过 24 小时。
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文献和实验动物血中超氧化物歧化酶的提取和活性测定 [原理] 超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，简称 SOD)广泛存在于生物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的金属类酶。它作为生物体内重要的自由基清除剂，可以清除体内多余的超氧阴离子，在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。离子(0 2 - )是人体氧代谢产物，它在体内过量积累会引起炎症
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一、原理 超氧物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）普遍存在于动、植物体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2，可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。二、材料
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