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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Malondialdehyde (MDA) kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样
丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量试剂盒说明书
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理:
MDA 与硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 532nm 有最大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定 600nm 下的吸光度,利用 532nm 与 600nm 下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。需自备的仪器和用品:
可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配置:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存; 注意事项:临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以 70℃-90℃加热,并振荡以促进溶解。
MDA 提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
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测定步骤:
1、吸取 0.6mL 试剂一于 1.5mL 离心管中,再加入 0.2mL 样本, 混匀。2、95℃水浴中保温 30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心 10min。
3、吸取上清液于 1mL 玻璃比色皿中,测定 532nm 和 600nm 处的吸光度,记为 A532 和 A600, ΔA= A532-A600。
1、血清(浆)中 MDA 含量的计算:
MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷V 样=25.8×ΔA
2、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
- 按照蛋白浓度计算
需要另外测定,建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
- 按照样品质量计算
MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500×V 样÷V 样总)=0.0516×ΔA
V 反总:反应体系总体积, 8×10-4 L;ε:丙二醛摩尔消光系数,155×103 L / mol /cm;d: 比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.2 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;Cpr: 样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。
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上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人丙二醛 (MDA)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和、唾液生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 MDA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 MDA与单抗结合,加入生物素化的抗人 MDA ,形成免疫复合











