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- Xkbio
- XK-SJH-A233
- 国产
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Xanthine Oxidase (XOD) Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
XOD（EC 1.17.3.2）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD 主要分布于哺乳动物的心，肺，肝脏等组织中，当肝功能受损时，XOD 大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。
测定原理：
XOD 催化黄嘌呤产生尿酸，尿酸在 290nm 下有特征吸收峰。需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：60mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：60mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：粉剂×4 瓶，4℃保存。粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
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操作步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 290nm，蒸馏水调零。2、 XOD 检测工作液的配制：用时在每瓶试剂二中加入 15mL 试剂一，充分混匀，现配现用；
3、测定前将XOD 检测工作液 37℃(哺乳动物)或 25℃（其它物种）水浴 10min。
4、取 1mLXOD 检测工作液于 1mL 石英比色皿中，再加入 35μL 样本，混匀，室温下立即测定 290nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2，计算 ΔA＝A2-A1。
XOD 活性计算：
1、血清（浆）XOD 计算：
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD（nmol/min/mL）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=2424×ΔA 2、组织、细菌或细胞中 XOD 计算：
- 按样本蛋白浓度计算：
XOD（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr)÷T =2424×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
XOD（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W ×V 样÷V 样总）÷T=2424×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
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文献和实验的毒副作用，如别嘌呤醇会导致体内脂质过氧化损伤，对肾脏、肝脏及皮肤黏膜都有较大的损害。因此，对高尿酸血症治疗新靶点和新药物的研究获得了广泛的关注，而建立稳定持续的高尿酸血症模型则是研究的重要前提。 图 1. 尿酸代谢途径[1] 尿酸是大多数动物体内嘌呤代谢的终产物，由黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，XOD）将次黄嘌呤（hypoxanthine，HX）、黄嘌呤（xanthine）等尿酸前体物质氧化而成。人体内 80% 的尿酸是由体内氨基酸等其他小分子化合物合成尿酸或分解代谢而来；20
（Assay Designs Inc.）[2].（8） ； ；SOD活性的测定采用黄嘌呤氧化酶法； 邻苯三氯自氧化法（SOD试剂盒，四川省医学试剂研究开发中心，Cu-Zn SOD南京建成生物工程研究所生产试剂盒）。Cu，Zn-Superoxide dismutase and Mn-superoxide dismutase activities were measured by using a water-soluble formazan dye kit.SOD activity was measured
水解，生成新的甘油，达到新的平衡，因此样品与R1试剂孵育时间越长，测得甘油三酯值就越低。甘油三酯测定，不仅要去除游离甘油，而且还要克服样本含量真实性发生的变化，试剂中必须加入甘油激酶，并且延迟时间要标准化。所以，一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时，会带来样品含量真实性的变化。 参考文献 [1]韩志钧，黄志锋，卢业成，主编．临床化学常用项目自动分析法[M]．沈阳：辽宁科学技术出版社，2005．29—112． [2]张万忠．临床生化试剂盒质量评估方法[J]．上海
