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LabFect RNAi Transfection 小核酸

转染试剂
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  • ¥3380
  • LABLEAD
  • 北京
  • T1011
  • 2026年02月18日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      蓝冰运输,4°C保存,超一个月不用于-20°C储存,避免反复冻融。-20℃保存条件下,有效期为1年。

    • 保质期

      -20℃保存条件下,有效期为1年。

    • 英文名

      LabFect RNAi Transfection

    • 供应商

      LABLEAD

    • 规格

      1.5ml

    LabFect 小核酸转染试剂
    货号:T1011
    存储条件:蓝冰运输,4°C保存,超一个月不用于-20°C储存,避免反复冻融。-20℃保存条件下,有效期为1年。
    产品说明
    LabFect可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞,如一般细胞株、肿瘤细胞株等。目前,无论国外还是国内,转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI),这两种成分都具有很大的细胞毒性,并且转染效果不好。LabFect采用新型的动物源性的纳米材料,毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。与其它品牌的小核酸转染试剂相比,LabFect的细胞转染阳性率一般在90%以上,Lamin A/C基因抑制效率在95%以上,而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一般不超过 70%,Lamin A/C基因抑制效率不超过75%。LabFect细胞毒性很低,转染细胞死亡率不到10%,而其它品牌试剂的转染细胞死亡率一般在30%以上。血清对转染效果没有影响,不必刻意添加或更换培养液。
    产品特点
    卓越的细胞转染性能:细胞转染阳性率高达 90%以上,基因敲除效果明显,A549 细胞 Lamin A/C基因敲除效率在95%以上;
    极低的细胞毒性:转染细胞死亡率不到 10%,大大降低了因细胞毒性 对实验结果的影响;
    转染细胞范围广,绝大多数贴壁细胞株都能获得比较理想的转染结果。
    应用
    siRNA 转染
    antisense RNA 转染
    200bp 内的小分子 DNA 转染
     
    操作步骤
    本说明书适用于24孔培养板的转染实验,其他规格的培养板的用量参照下面表格,表格给出的是每孔的用量与体积。
    1. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔500μl培养基,使细胞在转染时密度在30-50%,尽量不要使用抗生素。
    2. siRNA-LabFect混合物准备
    a. 6pmol siRNA用50μl无血清培养基稀释。
    b. 2μl LabFect 用50μl无血清培养基稀释。轻轻混匀,室温孵育5min。注意:确保在25 min内执行第三步操作,不要过于延迟。
    c. 孵育5min后,将siRNA稀释液与LabFect稀释液混合(总体积100μl)。轻轻混匀,室温孵育20 min。
    3. 将混合物加到培养的细胞内(完全培养基培养):
    a. 将100μl混合物加入培养孔内,培养孔内含有0.5ml培养的细胞。轻轻晃动培养板,混匀。
    b. 37°C 培养 18-72h,检测基因抑制效果。如果需要,细胞培养4-6h时可以更换培养基,但不是必须。孵育时间的长短,取决于细胞类型、所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。
    转染实验优化:为了提高转染效率,最好对转染条件进行优化,特别是首次使用。例如:24孔培养板,调整siRNA与LabFect试剂的用量。siRNA用量在0.6-30 pmol (final concentration 1-50 nM)之间调整,LabFect试剂用量在1.0-3.0μl之间调整。
    转染实验要点:转染过程尽量不要使用抗生素,否则会导致细胞死亡增加; 首次实验 siRNA 的用量设置在终浓度 10nM、30nM、50nM、100 nM 进行摸索 ,后续实验根据实验结果修改。
    质量控制
    本产品经严格的质量检验证明,无生物污染
    注意:
    本产品仅用于科研实验
    LabFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels
    Surface area/well Vol. of growth medium Vol. of dilution medium siRNA Amount LabFect
      (cm2)              (µl)               (µl)      (pmol)  (µl)
    96-well  0.3                100             2 x 10         1.2  0.4
    48-well  0.8                250             2 x 25                3          1
    24-well            2                500             2 x 50                6         2
    12-well            4             1000            2 x 100          12         4
    6-well  10             2500            2 x 250          30  10
     
     

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