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- 规格:
1μg/100μg
| 规格: | 1μg | 产品价格: | ¥888.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100μg | 产品价格: | ¥1169.0 |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D2806-1μg | pCMV-β-gal, pCMV-β-半乳糖苷酶质粒 | 1μg | 888.00元 |
| D2806-100μg | pCMV-β-gal, pCMV-β-半乳糖苷酶质粒 | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-β-Galactosidase (pCMV-β-gal, pCMV-β-半乳糖苷酶质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行β-半乳糖苷酶报告基因检测的质粒。β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,经常与萤光素酶报告基因一起转染细胞,被用作萤光素酶报告基因检测的内参照,从而消除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。
本质粒带有CMV启动子,可高效启动编码β-半乳糖苷酶的lacZ基因的转录。β-半乳糖苷酶可以用分光光度法、荧光法或化学发光法快速直接地在细胞提取物中检测。使用X-Gal作底物,β-半乳糖苷酶也被广泛用于原位组化分析。
pCMV-β-Galactosidase质粒既可单独转染,也可与目的 DNA 共转染。
本质粒为卡那霉素抗性。
pCMV-β-Galactosidase质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Lac Z | 989-4036 |
| Multiple cloning region | 4448-4501 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 4545-4565 |
| SV40 polyA signal | 4578-4960 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 5099-5403 |
| bla promoter | 5428-5552 |
| sv40 promoter | 5572-5910 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 5945-6736 |
| HSV-thymidine kinase(TK) polyA signal | 6737-7195 |
| pUC origin | 7324-7991 |
pCMV-β-Galactosidase质粒的图谱如下:

pCMV-β-Galactosidase的多克隆位点的详细图谱见说明书:www.beyotime.com/Manual/D2806 pCMV-β-Galactosidase.pdf
pCMV-β-Galactosidase中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-β-Galactosidase)包括:
| Afl II | Ahd I | Asc I | BspM II | BsrG I | BstE II | Eco72 I |
| EcoN I | Fse I | Nru I | Pme I | Pml I | PpuM I | Psp1406 I |
| Sap I |
pCMV-β-Galactosidase中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-β-Galactosidase once)包括:
| SnaB I | TAC|GTA | 347 | PaeR7 I | C`TCGA,G | 4479 |
| Nhe I | G`CTAG,C | 598 | Xho I | C`TCGA,G | 4479 |
| Sac II | CC,GC`GG | 663 | Spe I | A`CTAG,T | 4491 |
| Not I | GC`GGCC,GC | 669 | Bsp120 I | G`GGCC,C | 4497 |
| PspA I | C`CCGG,G | 681 | Apa I | G,GGCC`C | 4501 |
| Xma I | C`CCGG,G | 681 | Mun I | C`AATT,G | 4826 |
| Srf I | GCCC|GGGC | 683 | Sfi I | GGCCN,NNN`NGGCC | 5849 |
| Sma I | CCC|GGG | 683 | BseR I | GAGGAG 16/14 | 5892 |
| Hind III | A`AGCT,T | 694 | Stu I | AGG|CCT | 5895 |
| Age I | A`CCGG,T | 902 | Kas I | G`GCGC,C | 6073 |
| Ear I | CTCTTC 7/10 | 1078 | Nar I | GG`CG,CC | 6074 |
| BssH II | G`CGCG,C | 2475 | Ehe I | GGC|GCC | 6075 |
| Eco47 III | AGC|GCT | 2812 | Bbe I | G,GCGC`C | 6077 |
| Bst1107 I | GTA|TAC | 3742 | Msc I | TGG|CCA | 6156 |
| Xca I | GTA|TAC | 3742 | Tth111 I | GACN`N,NGTC | 6192 |
| BsiW I | C`GTAC,G | 3748 | BsrD I | GCAATG, 8 | 6307 |
| Spl I | C`GTAC,G | 3748 | Bsp1286 I | G,DGCH`C | 6377 |
| Blp I | GC`TNA,GC | 3990 | Rsr II | CG`GWC,CG | 6590 |
| Esp I | GC`TNA,GC | 3990 | BsiC I | TT`CG,AA | 6756 |
| Pst I | C,TGCA`G | 4453 | BstB I | TT`CG,AA | 6756 |
| Bgl II | A`GATC,T | 4473 | Bsa I | GGTCTC 7/11 | 7063 |
pCMV-β-Galactosidase质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 Primer(4545-4566): TAATACGACTCACTATAGG
pCMV-β-Galactosidase的全序列信息:D2806 pCMV-β-gal.txt
包装清单:| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2806-1μg | pCMV-β-Galactosidase | 1μg |
| D2806-100μg | pCMV-β-Galactosidase | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验ß-gal Staining: Reagents: 0.1M Phosphate Buffer (pH 7.3):
质粒转染细胞的效率受到多种因素的影响,如细胞的类型,细胞的状态,转染时细胞的密度,转染的方式(电转或化转),DNA 的质量、转染试剂的选择等。从质粒角度来看,超螺旋比例高,且内毒素残留低的质粒会更有利于提高细胞转染的效率。 pCMVβ DNA 用不同试剂盒提取,转染 Huh-7 细胞,转染效率对比 5. 质粒酶切有问题,切不开或者酶切有杂带 酶切切不开可能跟酶本身状态、酶切缓冲液、酶切温度以及质粒本身都有关系。从酶切条件考虑,在确保酶活性的前提下,选择合适的酶切缓冲液、温度
细菌不能利用arginine。 F’ 一个低拷贝可移动的质粒,当被M13噬菌体侵染时,可产生单链DNA。 LacI 编码lac抑制子,用于蓝白斑筛选时需加入IPTG,才可启动表达β-gal。 dam/dcm 消除了内源腺苷和鸟苷的甲基化。在此种细菌中繁殖的DNA不被甲基化 附:关于大肠杆菌 http://www.dxy.cn/bbs/thread/4335511 关于T载体 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1286939_1.html











