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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
50
- 细胞类型:
见详情说明
- 品系:
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- 组织来源:
见详情说明
- 相关疾病:
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- 物种来源:
人
- 免疫类型:
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- 细胞形态:
贴壁
- 器官来源:
见详情说明
- 运输方式:
常温/干冰运输
- 年限:
见详情说明
- 生长状态:
优良
- 规格:
1×106cells/T25培养瓶
1.1离心法
1.1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
1.1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到8ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
1.2不离心法
1.2.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,培养瓶中加入8ml左右培养基。
1.2.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.2.3将细胞悬液转移到加有培养基的培养瓶中,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养,接种16小时后更换培养基。
2.细胞传代
2.1准备细胞完全培养基,细胞培养瓶,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS。
2.2弃上清,并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
2.3加入1ml胰酶,室温或者37度消化,直到细胞成片脱落,加入3-4ml完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
2.4收集细胞悬液,1000转离心5分钟,弃上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
2.5将重悬好的细胞按比例分装至T25细胞培养瓶,补充培养基到8ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
3.细胞冻存
3.1准备细胞冻存液,细胞冻存管,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS。
3.2弃上清,并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
3.3加入1ml胰酶,室温或者37度消化,直到细胞成片脱落,加入完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
3.4收集细胞悬液,1000转离心5分钟,弃上清。
3.5加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度0.8-1.5×106细胞/ml。
3.6将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。
细胞系收货须知:
收到的货物会包含以下几种类型,您的货物属于:
□细胞冻存管:收到货物后,请检查箱子里面是否还有干冰。
● 若干冰已剩余不多,不能掩埋冻存管,请及时拍照,并第一时间联系销售。
● 若干冰充裕,可以安排复苏细胞;不安排复苏,请将细胞冻存管转移到液氮进行保存。短期(一周内)的存放可以放在-80冰箱,建议最好保存在液氮中。
□培养瓶的活细胞:收到请检查培养瓶是否完好,是否有漏液,培养基是否浑浊
●若出现以上问题请于当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
● 若以上问题都没有出现:拆掉培养瓶的外包装,在显微镜下对细胞进行多个视野,不同倍镜拍照。然后用酒精对瓶身进行彻底消毒,放在37度二氧化碳培养箱中进行复温。1-2小时后,拿出在显微镜下观察,并进行多个视野不同倍镜拍照。若细胞达到了可以传代的密度,请及时进行传代。若细胞密度不能进行传代,请回收培养瓶中的培养基,留适量培养基在瓶中,并将培养瓶放在培养箱继续培养即可。
□消化后的细胞悬液:收到请检查管子是否有漏液
●若漏液,请当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
●若完好,将管子用酒精彻底消毒,收集细胞悬液到离心管,1000转,离心5分钟,弃上清,加入培养基重悬,按照 比例分装到 个T25培养瓶,并补充培养基到 ml即可。
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文献和实验凹,除其边缘部分外,大部分区域只有视锥细胞而无视杆细胞,故为感光最敏锐的部分。人的视网膜约厚 0.1~ 0.5毫米,在组织学上将其分为 10层,其中主要由 4层细胞组成。由外向内依次为色素上皮细胞层、视细胞层、双极细胞层及神经节细胞层。 色素上皮细胞层:紧靠脉络膜,为一层单层上皮细胞,胞体内含有丰富的色素颗粒,并有胞突伸入至视细胞之间的间隙内。当强光照时,色素颗粒进入突起内,以保护视细胞不致接受过分强光的刺激;而当弱光时,色素颗粒退缩于细胞体内,使视细胞
"或"厉疽",其发生由于风邪搏于血气,变化所生;或脉络之血,滞于卫分,阳气束结而成;肾中浊气混于阳,阳气收束所致,和血凝气滞等因素有关。《诸病源候论·黑痣候》谓:"有黑痣者,风邪搏于血气,变化生也。夫人血气充盛,则皮肤润悦,不生疵瘕。若虚损则黑痣变生。"《外科正宗·黑子》中日:"黑子,痣名也。皮肾中浊气混浊于阳,阳气收束,结成黑子,坚而不散。"这些论述表明,恶性黑色素瘤之基本病因乃在虚损的基础之上,或外邪搏于血气,或阳气束结而致血瘀气滞。瘀血结聚,乌黑肿块。瘀久化热,热毒瘀阴,则色红溃烂,流污黑血水。虚
放射状排列的肌纤维为瞳孔开大肌,受交感神经支配,收缩时使瞳孔开大。后层细胞较大,呈立方形,胞质内充满色素颗粒。 图18-5 人眼球的虹膜 HE×200 4.睫状体 睫状体(ciliary body)位于虹膜与脉络膜之间,前段肥厚并伸出放射状的睫状突,后段渐平坦,终止于锯齿缘。睫状体由睫状肌、基质与上皮组成(图18-1)。睫状肌为平滑肌,密集分布于睫状体的外2/3区域。肌纤维的排列有三种方向:外侧的纵行纤维紧靠巩膜走行,前端附
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