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文献和实验股可作为独立的模块被设计和使用,因此增加了二元码策略的多样性(见注 4)。 在我们最初设计的四螺旋束库中,使用 4 条合成的寡核苷酸链构建全长基因。每条链都编码一个单独的螺旋及转角。如 9.2.1.2 中所述,转角区域都是固定的(即没有简并),以作为 DNA 聚合酶合成互补链时的引导位点(图 9.4;参考文献 [8])。 我们尝试了多种方法进行基因组装。比如同时构建了两个半基因库,将两者连接在一起生成编码全长蛋白质的基因库 [8]。为了确保做到正确的头尾相连,可在连接部位的固定区域
. N. > Arndt, K. M. , Pliickthun, A. , and Michnick, S. W. ( 1 999) An in vivo library-versus-library selection of optimized protein-protein interactions. Nature BiotechnoL 1 7, 683-690. 13. Braunagel, M. and Little, M. ( 1 997
制作成的,由于是两种不同性质的原料,其含糖量有差异。应先求出装罐固形物的平均含糖量,再配制糖液。 7.排气:放入真空预罐内整齐排列码好,密封罐盖,启动真空泵预抽。真空度达600毫米汞柱以上,时间20分钟。 8.封罐:采用真空封罐机,先启动真空泵,接通水源,真空度达到600毫米汞柱以上的稳定值后,真空封罐机方可工作。 9.灭菌:灭菌式为15′~20′~15′/100℃。 10.保温:保温库恒温≥20℃,时间7昼夜,夏季气温达25℃以上时,保温时间为5昼夜。
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