- ￥1680 - 3780
- 辉骏生物
- FI88807/FI88808
- 广东
- 2026年01月12日
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1000
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辉骏生物
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4 ℃
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具体价格请联系辉骏生物：4006991663
| 货号 | 规格 | 货期 |
| FI8804-20T | 20次 | 现货 |
| FI8804-40T | 40次 | 现货 |
GST pull-down试剂盒简介
辉骏生物的GST pull-down试剂盒能够高效调取GST融合蛋白在各类样本中的互作蛋白。在GST pull-down实验前，先通过基因工程技术手段将目标基因连入带有GST标签的原核表达载体中，并导入大肠杆菌中进行原核表达。之后，GST融合蛋白通过GTH（ Glutathione）树脂纯化。最后，加入样本裂解液孵育，样本中与GST融合蛋白有相互作用的蛋白便可被吸附而分离。分离的蛋白产物既可以用Western blot检测已知蛋白，也可以用质谱（LC-MS/MS）鉴定未知蛋白。
GST pull-down试剂盒应用
蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式，蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能，形成复杂的信号转导网络。以下列举了可应用GST pull down试剂盒的几个研究方向或研究领域：
1. 确定2个蛋白是否具有直接相互作用；
2. 确定蛋白之间结合的结构域；
3. 病毒、细菌等病原体侵染宿主细胞的机制；
4. 酶和底物的作用机制；
5. 蛋白调控复合体的研究。
GST pull down试剂盒组分
| 试剂名称 | 体积（20 Tests） | 体积（40 Tests） | 保存条件 |
| GST标签纯化树脂 | 950 μL | 1.9 mL | 4 ℃ |
| 裂解缓冲液 | 24 mL | 48 mL | 4 ℃ |
| 漂洗液 | 70 mL | 140 mL | 4 ℃ |
| 洗脱缓冲液 | 1.1 mL | 2.2 mL | 4 ℃ |
| 蛋白酶抑制剂 | 600 μL | 1.2 mL | -20 ℃ |
GST Pull down试剂盒优势
1、调取效率高：GST融合蛋白与树脂亲和力强，可以高效纯化目标蛋白及其互作蛋白；
2、适用范围广：优化的裂解液配方适用于动物、植物组织、微生物等各类型组织和细胞样本；
3、洗脱液适配后续Western Blot及质谱（LC-MS/MS）实验。
4、操作简便，耗时短，适用于初学者。
GST pulldown试剂盒使用流程简述
1. 通过原核表达系统表达带有GST标签的融合蛋白；
2. 在细菌上清液中加入GST标签亲和纯化树脂，4 ℃孵育2 小时；
3. 将待测样本裂解液加入上述体系中，4 ℃孵育过夜；
4. 漂洗、洗脱得到目标蛋白及其互作蛋白复合物。
GST pulldown试剂盒使用案例
GST pull down WB结果图（阳性）
GST Pull-down MS：Western blot检测图
GST pull-down MS：质谱检索表格（部分展示）
GST pull down试剂盒—客户文章
1. Ni P.Y. et al: YBX1-Mediated DNA Methylation-Dependent SHANK3 Expression in PBMCs and Developing Cortical Interneurons in Schizophrenia. Advanced Science. 2023. IF=17.521.
2. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021, IF=6.684.
3. Ma Y. et al: New insights into the proteins interacting with the promoters of silkworm fibroin genes. Scientific Reports. 2021, IF=4.379.
辉骏实力
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文献和实验1. Ni P.Y. et al: YBX1-Mediated DNA Methylation-Dependent SHANK3 Expression in PBMCs and Developing Cortical Interneurons in Schizophrenia. Advanced Science. 2023. IF=17.521.
2. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021, IF=6.684.
3. Ma Y. et al: New insights into the proteins interacting with the promoters of silkworm fibroin genes. Scientific Reports. 2021, IF=4.379.
一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down：是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合，融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化：①
5- If required, bring to 1pM RARE or any HRE you need 6- Incubate 30min at 4 _ C 7- Add 50_ L of the GST affinity matrix 8- Incubate for 2 hours at 4 _ C 9- Wash twice with PBS-DTT buffer (quick pulse to 500 x g) 10- Add 25_ L of SDS loading buffer directly
with 1/2 volume of 50% GST beads at 4C rocking on the Nutator for 30-60 minutes. 50 ml conical Falcon tubes work well. Pour into a BioRad Column and drain lysate. Save 100 ul of depleted lysate. Load 2.5 ul for SDS-PAGE. Wash beads with 3 column volumes
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