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- 2025年07月16日
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bj
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AFM测试
微球直径：2微米至18微米；背面涂层：有；
悬臂参数：
1 频率：力常数：长度：形状：
2 频率：力常数：长度：形状：
3 频率：力常数：长度：形状：
为什么选择微球探针
1 利用AFM检测细胞的力学性质主要受测量参数（针尖形状和加载速率）和检测位置的影响，而生物样品异质性强，如细胞核区和细胞质区刚度差别很大，球形探针和细胞接触面积大，大大减少了异质性造成的误差。另外研究发现锥形探针获得的细胞杨氏模量大大高于钝化针尖和球形探针，而钝化针尖和球形探针之间无显著差异。
2 使用球形探针能够更准确地估算针尖与样品之间的接触面积，从而可以利用更加准确的模型对力曲线进行拟合。每种探针采用的相应的模型：锥形探针采用Sneddon模型，球形探针采用Hertz模型。
3 球形探针与细胞之间的接触面积大，即使压入深入大时也能够避免对细胞的损伤，从而可以实现细胞膜下结构的力学性质检测。
4 原子力显微镜的探针除了能够作为力学表征工具，还能够作为机械刺激工具研究细胞的力学响应性。而相比常规探针，较大的球形探针能够更好的模拟细胞所处微环境的机械刺激，因此也更适用于细胞力学响应性研究中
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文献和实验Nature：量子显微镜与定位原子力显微术横空出世！前沿显微技术大盘点
microscopy「定位原子力显微术（LAFM）」[1]。该研究通过优化算法， 将原子力显微镜（AFM）的分辨率带到一个全新的高度。 对于传统的 AFM 与高速 AFM (HS-AFM)，前者的应用被限制在生物分子的表面分析，而后者只能算是一个优秀的蛋白质构象研究工具。受限于 AFM 探针的大小以及生物大分子的「弹性结构」，这两种工具的分辨率在 x,y 方向上只能达到 1nm，并不能给出更精细的生物大分子结构。 图片来源：Nature 研究团队受到了 2014 年获得诺奖的超分辨率荧光显微技术启发，将其中的
，然后第二天用 NucView 550 (Biotium) 施用不同浓度的星形孢菌素（STS）。NucView 550 是 caspase-3 荧光探针，死细胞核用红色荧光染色。用 STS 和 NucView 550 处理后，将 HT-29 微球用 4% 多聚甲醛固定并用 0.5%Triton X-100 / PBS（-）通透性处理。微球的细胞核在 4°C（39.2°F）下用 Hoechst 33342 过夜染色。染色后，用 SCALEVIEW-S4 将微球透明化。 成像和分析 我们使用 FV
液态芯片原理 编码微球：分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球（Beads）染成不同的荧光色，从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原：把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应：先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合，再加入被检测物（可以是血清中的抗原、抗体或酶等，也可以是PCR产物）。 悬液中的微球与被检测物特异性结合，结合物被标记上荧
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