- ￥120
- WB服务内容：蛋白提取开始，进行电泳转印、封闭、抗体孵育及ECL发光，最终进行基于图像灰度值的定量分析。 依科生物提供的实验报告中包括实验基本流程、蛋白定量原始数据、抗体孵育方式、图像灰度值分析及曝光原始图像。最终提供完整的实验报告，承诺检测结果准确、客观。
- 陕西西安
- 2025年07月12日
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- 提供商：
西安依科生物
- 服务名称：
WB检测服务
- 规格：
每个样品/指标
一、您需要提供的信息及物质
1、样本种属和指标名称
2、抗体，包括货号及说明书
3、实验样本
未用完的样本和抗体可以返还
二、样本收集和运输
1、组织样本
收集： 取材应在冰上进行，取材后组织用生理盐水冲洗干净，去除血渍和污物，并剔除非研究所需的组织；
保存：吸干水渍并切小块，放入已标记的冻存管中，液氮速冻后，转运至-80℃冰箱，可以保存半年左右；
运输：使用大体积干冰运输；
2、细胞样本
贴壁收集：细胞培养或处理结束后，去除培养液，用预冷的PBS缓冲液快速冲洗细胞以去除培养基，而后加入少量预冷的PBS，使用细胞刮刀将细胞刮下，移于1.5ml离心管中，4℃1500rpm离心去除上清；得到的沉淀为细胞样本。
悬浮细胞：细胞培养或处理结束后于4℃1500rpm离心去除上清培养基，加入预冷PBS轻柔吹打重悬细胞并转移至1.5ml离心管中，4℃1500rpm离心去除上清PBS以洗去培养基，洗涤操作需要重复一次。最后离心得到的沉淀为细胞样本。
保存：液氮速冻后于-80 ℃冰箱中保存，可以保存半年左右。
运输：使用大体积干冰运输；
3、特殊样本：植物、细菌或者做过特殊处理的样本需要联系客服进行沟通。
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文献和实验做了很久的 WB（western blot），走了很多弯路，其实发现 WB 想要做好并不难，总结了 WB 实验中可能会遇到的问题，分析了可能的原因及对应的解决方案，希望能成为你实验成功的基石。 问题 1：转膜不充分 (1) 膜没有完全均匀湿透 使用 100% methanol 浸透膜。 (2) 靶蛋白分子量小于 10 000 选择小孔径的膜，缩短转移
，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。Western blot方法由于蛋白是以非共价键形式吸附在固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，因此能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变，从而被广泛的用于检测蛋白水平的表达。这一方法导致了细胞生物学领域大量成果的涌现，但是仍然受限于WB实验需要大量细胞原料和昂贵的抗体，而且这一方法也不能同时进行多个蛋白的检测。随着细胞网络中成百上千的蛋白被发现，科学家们越来越希望能分析这些蛋白的活动，和蛋白之间的相互作用。正如Jones
WB 作为传统的实验技术，在实验室中得到了广泛的应用。 讲座从 WB 的基础原理、实验流程及常见问题和解决方法等方面对此项技术进行全面的介绍，结合具体实验案例，深入浅出的对 WB 技术进行解析，无论实验新手还是富有经验的操作者，都可以从讲座中获得所需的知识，用于获得更为完美的 WB 实验结果。
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