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55
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详见说明
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详见说明
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海梵态生物科技有限公司
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详见说明
- 规格:
100ml
详细说明书请联系客服
规格:10ml/100ml/500ml等
保存条件:-20°C
elsia试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
豚鼠血清
注意事项:豚鼠血清
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
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文献和实验电泳是通过电场作用将C4迁移率不同的同种异型分离开,然后依照分型标准定型。在某些情况下,C4A某种同种异型与C4B某种同种异型迁移率相同不易区分开,此时可用溶血覆盖技术加以区别。 1、原理 用肼处理豚鼠血清,可灭活其补体成分C4,使之成为帜缺乏的血清。将C4缺乏的豚鼠血清与致敏的SRBC混合,因缺乏C4,补体的攻膜效应不能发挥,将混合物与一定浓度琼脂糖混合倾注在电泳完毕的凝胶板上,凝胶板上C4区带使混合物中的C4成分得以补偿,溶血反应发生,凝胶板上C4条带区可出现透明溶血带。C4B的溶血
血清中有免疫复合物存在时,可与其本身的C1(内源性C1)结合。将被检血清56℃加热1h,能破坏结合的C1,空出补体结合位点。当加入豚鼠血清(外源性C1)及指示系统(致敏SRBC)时,CIC又可与外源性C1结合,使致敏SRBC的溶血被抑制。1、试剂(1)缓冲生理盐水 NaCl l7.00g,NaaHP04 1.13g,KH2P04 0.27g,蒸馏水溶解至100ml。用时取此液5mL,加蒸馏水95ml,10%硫酸镁0.1ml当日使用;(2)溶血素 按效价以缓冲盐水稀释至2单位;(3)2%SRBC
将豚鼠血清用水合肼或氨水处理去除其中的C4,这种C4缺乏血清(简称R4)不能使致敏的SRBC溶解,当加入含有C4的受检血清后,级联酶促反应发生即可导致致敏的SRBC溶解。溶血的程度与待测血清中C4的活性相关。1、无补体C4-抗原抗体复合物(EAR4)的制备 在新鲜豚鼠血清中按每ml加0.15mol/L氨水0.25ml或0.75mol/L水合肼0.25ml,混合后置37℃水浴30~90min,灭活其中的C4。用1mol/LHCl调节至pH7.2备用,取5%SRBC悬液与等体积4U溶血素混合
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