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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
PG13
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- 肿瘤类型:
.
- 细胞类型:
详见说明
- 品系:
详见说明
- 组织来源:
胚胎;成纤维细胞
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
ATCC
- 免疫类型:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 是否是肿瘤细胞:
.
- 器官来源:
胚胎;成纤维细胞
- 运输方式:
常温或者干冰
- 年限:
详见说明
- 生长状态:
贴壁
(逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞) PG13
|
种属 |
小鼠 |
|
别称 |
PG13 |
|
组织来源 |
胚胎 |
|
疾病 |
白血病 |
|
传代比例/细胞消化 |
1:2传代 ,消化2-3分钟 |
|
简介 |
PG13是一种逆转录病毒包装细胞系 ,来源于TK-NIH/3T3细胞 ,基于长臂猿白血病病毒(GaLV)。 |
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完全培养基配置 |
DMEM培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
|
形态 |
成纤维细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
|
倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
|
培养条件 |
气相:空气 ,95% ;二氧化碳 ,5%。 温度:37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。 |
|
冻存条件 |
冻存液:90%FBS ,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:官网货号JY-H040 |
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保藏机构 |
ATCC;CRL-10686 |
|
产品使用 |
仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
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文献和实验NIH3T3细胞中本身是没有TK的,1981年Scolnick利用lambda载体把胸腺嘧啶激酶(TK)转入NIH3T3细胞,构建成NIH3T3 TK细胞,所以细胞分为NIH3T3 TK+和NIH3T3 TK-两种细胞,在Scolnick认为NIH3T3就是NIH3T3(TK-)。 他做转染细胞的基础是基于1969年Todaro的实验。 具体内容参看建株文献:J Virol.1981 September; 39(3): 935–944
RCR 实验,就是检测逆转录病毒的可复制性。刚开始由同事负责这个实验,结果一直问题不断,后来由我接手,从失败到成功,历时两个月,感触颇深!我们检测的是 GALV(gibbon ape leukemia virus)病毒的可复制性,根据现有 paper 中的做法,一是通过 qPCR 检测 GALV 病毒某段特定序列,二是 PG4 细胞空斑实验。1 qPCR 方法根据论文中的引物序列我们合成了引物,然后通过 SYBR 法来检测目的基因。一个很简单的 qPCR,看似一切都很正常,然而后续问题却接连
、PG13、DA、CFA(第三代包装细胞),包装细胞可提供逆转录病毒gag、pol和env蛋白才能使带有包装信号及目的基因的病毒载体RNA进行包装,包装细胞只提供gag、pol和env蛋白而不产生具有复制能力的野生型病毒(RCR),而第一代包装细胞可产生 RCR,安全性较差;第二代包装细胞,临床上已广泛应用,也未发现产生RCR,安全性好;第三代包装细胞更加安全,第三代包装细胞中主要区别是病毒结构基因中env不同。 反转录病毒作为基因转移的载体有如下特点:①反转录病毒感染细胞的效率高,基因








