潮霉素 B 来源于吸水链霉菌

Hygromycin B的基本性质和贮存

，不溶于非极性溶剂。对金葡菌209P、肺炎杆菌与人型结核杆菌的最小抑菌浓度MIC为25、12.5与1.56μg/ml，对沟端螺旋体、支原体亦有作用。实验室 用的潮霉素一般为潮霉素B(Hygromycin B)。 潮霉素B在20世纪50年代被发现，当时用作动物用药。而现在它仍然作为驱虫抗虫药被加入鸡和猪的饲料中。用于产生潮霉素的吸水链霉菌在1953年被首次从土壤中分离并获得纯培养 。潮霉素B相关的抗性基因发现于20世纪80年代早期。 潮霉素B与大多数氨

免疫荧光双标实验操作方法与注意事项

9.滴加链霉菌抗生物素蛋白—碱性磷酸酶，室温孵育10分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟 10.碱性磷酸酶显色液(BCIP/NBT)显色(紫蓝色).PBS冲洗3次，每次5分钟; 11.滴加0.05%盐酸，室温10分钟(可避免已显色的抗原褪色); 12.滴加抗小鼠二抗同种属的非免疫血清，37~C孵育10分钟; 13.滴加B特异性抗体(如小鼠抗B抗体)，4~C过夜孵育。PBS冲洗3次，每次5分钟; 14.滴加生物素化抗小鼠二抗，室温孵育切片10分钟

DNA（基因）检测－Southern Blot

，将 Whatman 3MM 滤纸放在玻璃板上，两头浸在液体中，用玻棒赶除气泡。 4． 心地将琼脂糖凝胶翻过（扣过来）滑到纸上，放平、赶除气泡。 5． 将预先浸于溶液 B 中的 NC 膜，平铺在胶上，用玻棒赶除气泡。 6． 在膜上放置两层预先以 10 × SSC 浸湿的 Whatman 3MM 滤纸。 7． 再放 6 张干燥吸水纸及 4 堆 3cm 厚的折叠吸水纸。 8． 在纸上覆盖玻璃平板，板上可置约 250g 重物，下部缓冲液根据虹吸原理能被吸上