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上海益启生物科技有限公司
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100G
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文献和实验铵1分钟; (8)流水洗; (9)干燥后梯度乙醇脱水,二甲苯透明; (10)甘油明胶封固。 3.结果 酶活性处显示黑棕色。 4.对照实验 ①用β―甘油磷酸钠代替ATP钠盐应为阴性;②孵育液中加入ι―四咪唑抑制碱性磷酸酶排除假阳性;③去底物。 5.注意事项 此法要求Ca:―浓度在孵育前后不能降低,否则产生的磷酸根离子不能被完全捕获而影响准确定位。如染色效果不好可在孵育前将切片放入1%CaCl2 溶液中,37℃作用5分钟。
的螯合剂有以下这些物质:CaNa 2 ·EDTA(乙二胺四乙酸钙二钠)—Pb,Cd,Mn;BAL(2,3——二巯基丙醇)—Hg,As,Cr;β,β—二甲基半胱氨酸—pb,Hg;二乙基二硫代氨基甲酸钠三水合物等。但是,镉中毒时,用螯合剂会使肾的损害加剧,因此,遇此情况时,尽量不用螯合剂为好。对有机铅之类物质中毒,用螯合剂解毒则无能为力。此外,螯合剂对生物体所必需的重金属也起螯合作用,因而,使用时需加以注意。
(1)10 ×缺口平移缓冲液:200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2;100mmol/Lβ-巯基乙醇、1mg/ml BSA。 (2)缺口平移反应终止液:200mmol/L NaCl;10mmol/l Tris-HCl,pH7.4;11mmol/L EDTA; 0.5% SDS。 (3)DNaseⅠ:干粉状DNaseⅠ(2000~3000u/mg)溶于20mmol/l Tris-HCl,pH7.5中(1mg/ml),10μl分装,-20
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