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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
人间充质干细胞成脂诱导分化培养试剂盒
- 库存：
100
- 供应商：
/
- 肿瘤类型：
/
- 细胞类型：
详见说明
- 品系：
详见说明
- 组织来源：
ATCC/DSMZ/ECACC
- 相关疾病：
详见说明
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见相关文献
- 细胞形态：
贴壁/悬浮
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 器官来源：
详见说明
- 运输方式：
常温/干冰冻存
- 年限：
2-5代
- 生长状态：
优良
- 规格：
套
人 间 充 质 干 细 胞 成 脂 诱 导 分 化 培 养 试 剂 盒
1. 产品信息
| 产品名称 | 人间充质干细胞成脂诱导分化培养试剂盒 |
| 产品规格 | 125mL |
● 本产品由我公司干细胞科研团队根据不同组织来源的间充质干细胞成脂诱导分化培养特性，经过长期的实验 研究、不断的工艺优化而设计；
● 本产品能够有效提高间充质干细胞成脂诱导分化效率；
● 严格控制产品质量，无细菌、真菌及支原体污染，确保诱导分化培养的安全性。
3. 产品主要组成及保存条件
| 产品组成名称 | 体积 | 保存条件 |
| 间充质干细胞成脂分化基础培养基 | 112mL | 4℃ |
| 成脂诱导分化试剂A | 130μL | -20℃ |
| 成脂诱导分化试剂B | 130μL | -20℃ |
| 成脂诱导分化试剂C | 130μL | -20℃ |
| 成脂诱导分化试剂D | 130μL | -20℃ |
| 成脂诱导分化试剂户 | 13mL | -20℃ |
| 染色液A | 10mL | 25℃ |
| 染色液B | 4mL | 25℃ |
● 本产品按照保存条件保存，保质期为1年；
● 产品请于保质期内使用；
● 为保证产品质量，请勿反复冻融。
5. 注意事项
● 在无菌条件下处理该产品，本产品不含双抗，可根据实验需求自行添加；
● 为保证诱导分化效果，建议使用本公司专用的间充质干细胞培养基、冻存液、胰蛋白酶等配套试剂；
● 该产品仅限科研使用。
6. 产品使用
1) 产品配制步骤
● 成脂诱导分化试剂A、试剂B、试剂C、试剂D和试剂E预先放置37℃溶解。
● 在无菌条件下，按照无菌操作标准打开间充质干细胞成脂分化基础培养基和A、B、C、D、E五种试剂的瓶/ 管盖。
● 染色工作液配制：染色液A和染色B按照体积比为5:2的比例配制，充分混匀，0 .22μm过滤器过滤后使用。 染色工作液现配现用。
2) 细胞诱导分化步骤(以6孔板为例)
● 常规培养：人间充质干细胞置于37℃、5%CO2、95%湿度的培养箱中常规培养。
● 细胞接种：当细胞汇合度达到80%以上时，用细胞消化液对细胞进行常规消化并计数，以2.5×10⁴cells/mL 的细胞密度接种至六孔板中，每孔加入2mL细胞悬液，轻柔地上下左右十字摇晃6孔板5次，使细胞悬液 均匀分布于6孔板中，置于37℃、5%C02、95%湿度的培养箱中常规培养。
● 成脂诱导培养：当细胞汇合度达到90%时，吸弃旧培养基，每孔加入2 .0mL成脂诱导分化完全培养基。每 隔2-3天换一次成脂诱导分化完全培养基，诱导培养2-4周时，根据观察脂滴形成情况，用染色工作液进行 染色。
3) 细胞染色步骤
● 吸弃六孔板中的培养基，用1×磷酸盐缓冲液冲洗3次。
● 每孔加入2mL4%多聚甲全溶液固定20min。
● 吸弃4%多聚甲全溶液，用1×磷酸盐缓冲液冲洗3次。
● 每孔中加入1mL染色工作液染色20min。
● 吸弃染色工作液，用超纯水冲洗3-5次后于倒置显微镜下观察成脂染色效果并拍照。
● 染色效果实例图片：
人间充质干细胞成脂诱导分化染色图(脂肪来源，P5代)
其中，A和C代表阴性对照组；B和D代表诱导分化组
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data
期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
生长培养基（C-28010）培养剩余的一个样本作为阴性对照。5、间充质干细胞的分化培养至少培养3天，每48小时更换一次培养基。注意：诱导后只要1天就观察到细胞显著的形态学变化。6、收获和验证细胞MSC来源的神经细胞可以选择性的根据的“神经细胞标记物的检测”来进-步验证细胞的特征。 二、向成骨分化的操作流程 1、接种充质干细胞在24组织培养板中用MSC生长培养基接种间充质干细胞，每接种6x104个MSC（接种密度为3.15x104个/cm2）。2、间充质干细胞的生长要点：让细胞达到≥100
远远比常规试剂盒提取高，更好的保留外泌体的活性和形态； 大规模提取是有参考的解决方案的，这两篇文献很好的做了阐释。 关键步骤 [1]： ● 收集条件培养基（CM）：收集神经母细胞瘤 N2a 和成肌细胞 C2C12 的培养基，经过低速离心和 0.22 μm 过滤去除大颗粒和细胞碎片。 ● 处理大体积培养基：对于大体积培养基（50 ml 至 200 mL），使用切向流过滤（TFF）系统进行浓缩和透析，然后加载到结合-洗脱分子筛层析（BE-SEC）柱上进行纯化。 ● 分离 EVs：根据 280 nm
胚胎干细胞的转染而设计的。胚胎干细胞的研究持续升温，但转染始终是个令人头疼的问题。胚胎干细胞似乎“百毒不侵”，抗拒着外来的DNA。Xfect mESC则是从2300多个候选者中脱颖而出的佼佼者，在干细胞转染上有着不俗的表现。经过验证，它在小鼠胚胎干细胞系E14TG2A 和D3中的转染效率均高于市场上畅销的其他试剂。Xfect mESC的价格为2375元/100次。 之后，Clontech又为人成体干细胞研究推出了Xfect™ Adult Stem Cell转染试剂。它的配方经过修改，能在人间充质干细胞
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