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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
胰蛋白酶
- 库存:
100
- 供应商:
/
- 肿瘤类型:
/
- 细胞类型:
详见说明
- 品系:
详见说明
- 组织来源:
ATCC/DSMZ/ECACC
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见相关文献
- 细胞形态:
贴壁/悬浮
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 器官来源:
详见说明
- 运输方式:
常温/干冰冻存
- 年限:
2-5代
- 生长状态:
优良
- 规格:
50ml
1. 产品信息
| 产品名称 | 胰蛋白酶 |
| 产品规格 | 50mL |
2. 产品说明
本产品由本公司干细胞科研团队根据间充质干细胞培养特性,经过长期的实验研究、不断的工艺优化而设计, 含有0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化, 最大限度保持间充质干细胞生物学特性,具有方便快速、稳定安全等特点。
3. 质量控制
| 检测项目 | 质量标准 |
| 无菌 | 阴性 |
| 支原体 | 阴性 |
| 内毒素 | <0.25EU/m |
| pH值 | 7.0-7.4 |
4. 产品保存
● 产品保存温度为-20℃,保质期为6个月;
● 产品请于保质期内使用,超过保质期,请勿使用,按照医疗垃圾处理;
5. 产品使用
● 显微镜下观察培养中的细胞,当汇合度达到80-90%时,采用间充质干细胞专用胰蛋白酶进行消化处理;
● 无菌条件下,吸弃旧培养液,向每个培养瓶或培养皿中加入与培养液等体积的无菌细胞清洗液(生理盐水或 不含钙、镁离子的磷酸盐缓冲液等)清洗细胞2次,以去除残余的培养液;
● 加入间充质干细胞专用胰蛋白酶溶液浸润整个皿底,加入量以盖过细胞即可(推荐用量:1ml/25-50cm?),室 温静置孵育1-2min;
● 显微镜下观察消化情况,当80%细胞皱缩、变圆时,加入和胰蛋白酶相同体积的血清或3倍体积的干细胞 专用培养基终止消化;
● 用移液管吸取溶液,轻柔吹打底部,直至全部细胞脱落后收集至离心管中,充分混匀后吸取适量细胞悬液进 行细胞计数和活率检测,离心管置于离心机内,500g离心5mino
● 离心结束后弃上清,采用干细胞专用培养基重悬细胞后直接用于后续实验。
6. 注意事项
● 在无菌条件下处理该产品;
● 为保证产品质量,不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
● 实验人员应依据不同的细胞种类以确定最佳消化时间,不宜消化过度,否则会影响细胞的生长状况;
● 该产品仅限科研使用。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data
期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
[原理] 在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外,还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶:胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。在胰蛋白酶提取过程中,三者彼此很难分开。需采用合适的方法进一步分离纯化。 从动物胰脏中提取胰蛋白酶,一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来,然后根据等电点沉淀的原理将提取液的pH值调至酸性(pH3.0左右),使大量的酸性
样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
问:有人说白颜色胰蛋白酶的要比黄颜色的效果好,是吗?我近期买的胰蛋白酶倒是白颜色的,但是不能溶解在PBS中,呈细小的悬浮颗粒状,是GIBCO公司出产的。这会是什么原因呢?望各位师兄师姐回复。 答:以我们的经验确实是这样的,我们做过比较的是白颜色的比较好,究其原因我们认为是黄颜色的胰蛋白酶提纯不够,里面混有杂质所致。
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