DNS试剂

DNS试剂储存条件：—20℃,避光,12个月
用途：又称遗传霉素,新霉素,对细菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳动物细胞具有氨基苷类毒性,对真核细胞进行筛选。
标准溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標簽。
2 。在校正前，準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。

特点：
1、采用全进口原料：高效、灵敏、特异，严格引进国际技术标准进行批量。
2、先进的优化方案：重复性高，可靠性强，效果稳定。 3、购买本公司的溶液，提供免费代测技术服务的，有技术疑问可以提供一对一的解答，存在质量问题可申请退换。
4、技术服务：专业，及时，耐心。
注意事项：
1.根据实验具体要求操作，以说明书为准。 
2.一般植物细胞筛选浓度在20~200μg/ml，动物细胞筛选浓度50~1000μg/ml，应根据具体实验选择最佳筛选浓度。
3.做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制。
4.必须戴好防护用具，小心翼翼进行操作。
5.购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话，要更加注意其保管和管理。
6.对于使用后的废弃物，不要或旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。
TR ELISA Kit  大鼠凝血酶受体     96T
MTF(Human microtransferrinuria) ELISA Kit  人微量转铁蛋白     96T
sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit  小鼠横纹肌辅肌动蛋白α     96T
MYS(Mouse Myosin) ELISA Kit  小鼠肌球蛋白     96T
cTn- I ELISA Kit  大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ     96T
TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit  人基质金属蛋白酶组织抑制因子1     96T
PI3K ELISA Kit  大鼠磷酸肌醇3激酶     96T
MHC I /H-2 I (Mouse major histocompatibility complex I ) ELISA Kit  小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类     96T
MBP(Human myelin basic protein autoantibody) ELISA Kit  人髓鞘碱性蛋白抗体     96T
PKB ELISA Kit  大鼠蛋白激酶B     96T
GATA4Mouse GATA binding protein 4) ELISA Kit  小鼠GATA结合蛋白4     96T
TPA(Human Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit  人组织多肽抗原     96T
Human lung cancer Marker ELISA Kit  人肺癌标志物     96T
DNS试剂IP-10/CXCL10(Mouse interferon-inducible protein 10) ELISA Kit  小鼠干扰素诱导蛋白10     96T
sIgA ELISA Kit  大鼠分泌型免疫球蛋白A     96T
human gastric carcinoma Marker ELISA Kit  人胃癌标志物     96T
HO-2 ELISA Kit  大鼠血红素氧合酶2     96T
ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit  小鼠上皮中性粒细胞活化肽78     96T
OLAb(Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody) ELISA KIT  小鼠氧化低密度脂蛋白抗体     96T
Cr ELISA Kit  大鼠骨胶原交联     96T
HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit  人鳞状上皮细胞癌抗原2     96T
C I  ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽     96T
Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit  人胰腺癌标志物CA242     96T
ASMA(Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit  小鼠抗平滑肌抗体     96T
Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit  人胃肠癌标志物CA199     96T
M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit  小鼠胚胎干细胞系MESPU30     96T
DPD ELISA Kit  大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉     96T
PY ELISA Kit  大鼠吡啶交联物     96T
NF-KapB p65(Mouse nuclear factor-KapB p65) ELISA Kit  小鼠核因子κB亚基p65亲和肽     96T
Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit  人乳腺癌标志物-CA153     96T
OPN ELISA Kit  大鼠骨桥素     96T
GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse platelet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit  小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa     96T
Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit  人卵巢癌标志物CA125     96T
AFP(Human Alpha-fetoprotein) ELISA Kit  人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白     96T
FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit  小鼠游离脂肪酸     96T
使用方法：
1.  常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。 一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。
1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。 3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。 3.   稳定转染细胞的筛选
1）     转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。 注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2） 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。 3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4） 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5） 之后更换正常培养基培养即可。