解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 9 (ADAM9) 96T Rattus norvegicus (Rat)
铁调素(Hepc)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Hepcidin (Hepc) 96T Homo sapiens (Human)
Toll样受体3(TLR3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Toll Like Receptor 3 (TLR3) 96T Mus musculus (Mouse)
白介素35(IL35)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 35 (IL35) 96T Mus musculus (Mouse)
骨成型蛋白10(BMP10)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 96T Mus musculus (Mouse)
Ⅻ型胶原(COL12)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Collagen Type XII (COL12) 96T Homo sapiens (Human)
衰老关键蛋白1(FBLN1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Fibulin 1 (FBLN1) 96T Homo sapiens (Human)
硬骨素(SOST)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Sclerostin (SOST) 96T Mus musculus (Mouse)
肝配蛋白A5(EFNA5)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Ephrin A5 (EFNA5) 96T Homo sapiens (Human)
免疫球蛋白A2(IgA2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin A2 (IgA2) 96T Homo sapiens (Human)
沉默调节蛋白1(SIRT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
衰老关键蛋白3(FBLN3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Fibulin 3 (FBLN3) 96T Homo sapiens (Human)
叶酸受体1(FOLR1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 96T Homo sapiens (Human)
Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Klotho (KL) 96T Homo sapiens (Human)
Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Klotho (KL) 96T Mus musculus (Mouse)
卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 96T Homo sapiens (Human)
饥饿素(GHRL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Ghrelin (GHRL) 96T Chicken (Gallus)
TESCA缓冲液骨织素(OSTN)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Osteocrin (OSTN) 96T Mus musculus (Mouse)
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1) 96T Homo sapiens (Human)
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1) 96T Mus musculus (Mouse)
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4) 96T Rattus norvegicus (Rat)
无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员2(WNT2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员1(WNT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 1 (WNT1) 96T Homo sapiens (Human)
WNT抑制因子1(WIF1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for WNT Inhibitory Factor 1 (WIF1) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员5B(WNT5B)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B (WNT5B) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 96T Rattus norvegicus (Rat)
无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 10A (WNT10A) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员7B(WNT7B)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7B (WNT7B) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员7A(WNT7A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7A (WNT7A) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 96T Mus musculus (Mouse)
无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 96T Rattus norvegicus (Rat)
无翅型MMTV整合位点家族成员11(WNT11)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11 (WNT11) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员10B(WNT10B)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 10B (WNT10B) 96T Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员10B(WNT10B)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 10B (WNT10B) 96T Mus musculus (Mouse)
含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3 (ZBED3) 96T Homo sapiens (Human)
酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Zymogen Granule Protein 16 Homolog B (ZG16B) 96T Homo sapiens (Human)
X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6) 96T Homo sapiens (Human)
X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6) 96T Mus musculus (Mouse)
注意事项:
a.尽量减少反复冻融的次数,以免失效。 b.基因转染到细胞内要一段时间才能表达出蛋白质, 所以筛选不能太早。
c. 筛选也不宜太迟,一般要在转染24h之后才开始加G418筛选。因为转染了外源基因 的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,最终导致筛选不出阳性克隆。
4. 随着细胞代谢,G418的浓度和活性都会下降,应每3~5天更换一次含有G418的筛选液,这时药物浓度可以降至200μg/ml。
5.加药筛选约5~7天左右,细胞会大量死亡,为了减少死亡细胞对阳性克隆的不利影响以及增加阳性克隆的得到率,可以应用套环法或刮除法结合有限稀释法来筛选阳性克隆。加药后,在高倍镜下,刮除阴性克隆,消化阳性克隆后继续筛选培养。或者用套环套住阳性克隆,在套环内加胰蛋白酶或EDTA消化,把消化液吸到另外一个新的孔中培养,最后再用有限稀释法把阳性克隆在96孔板中筛选。 6. 一般经过4周左右的筛选,得到的阳性克隆都比较稳定。但是外源基因如果没有整合到基因组中的话,目的基因还是很容易丢失的,再次筛选往往是必不可少的,经过2次以上的筛选之后才能找到遗传稳定的细胞克隆。
7.尽量避免污染。
8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
免疫学试剂:
PBS(0.01mol/L,pH7.2-7.4)、PBST、抗荧光淬灭封片剂、甘油明胶封固液、中性树胶、柠檬酸钠抗原修复液(50×)、Tris-EDTA抗原修复液、ELISA洗涤液、ELISA包被缓冲液、ELISA封闭液、免疫染色一抗稀释液、荧光抗体稀释液、TMB底物显色试剂盒。 固定液:多聚(4%) 、中性福尔马林固定液(10%)、环保组织固定液(即用型)、Carnoy固定液、Bouin's固定液、等。
脱钙液:甲酸脱钙液、脱钙终点检测试剂盒等。
班氏试剂、斐林试剂、罗斯试剂、Molisch试剂、Seliwanoff试剂、Tollen试剂、Griess试剂、醋酸白试剂、血红蛋白检测试剂盒、活化部分凝血活酶时间(APTT)检测试剂盒、优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒、尿蛋白检测试剂盒、尿本-周氏蛋白定性检测试剂盒、粪便隐血定性检测试剂盒、脑脊液总蛋白检测试剂盒、总蛋白检测试剂盒、植物总糖和还原糖检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)、乳酸检测试剂盒、铁(钙、磷)检测试剂盒、尿素/尿酸检测试剂盒、总胆固醇(TC)检测试剂盒、肝素钠检测试剂盒、维生素C检测试剂盒、碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒、乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒、淀粉酶(AMS)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)检测试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒、过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒等。 G418溶液(geneticin,20mg/ml)
标准溶液的配制:
1.直接配制法 对于纯净的物质(称做基准物质)可准确进行称量,用蒸馏水溶解后,转移到一定容积的容量瓶中稀释至标线,溶液的准确浓度可以直接计算出来。溶质的纯度、性质等对浓度有较大影响,为此,对用来直接配制标准溶液用的基准物质必须具备以下条件: (1)物质的纯度要高,含量不得低于99.9%,杂质的含量应当少到可以忽略的程度。 (2)物质的分子组成应与其化学式完全符合,包括结水合物中的结品水含量也必须与其化学式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。
(3)性质稳定,贮蔵时应不发生变化,不易吸收空气中的水分、二氧化碳等气体而改变其成分,不易风化潮解和被空气氧化,烘干时不易分解等。此外最好使用分子量较大的基准物质以减小称量误差。
2.间接配制法 凡不符合基准物质条件的物质,可先配制成近似所需浓度的溶液,再用基准物质溶液或能与其发生定量反应的标准溶液进行滴定,求其准确浓度,这种通过滴定来确定准确浓度的操作叫做“标定”。间接法配制近似浓度溶液时不需用分析天平称量和容量瓶配制,可用台秤、量筒等器皿。将称好的物质转移到干净的试剂瓶中,先加少量蒸馏水将其溶解,继续用量筒加蒸馏水至需要量即可。由于大多数试剂不符合基准物的条件,故间接法配制标准溶液是经常的。如固体NaOH因易吸收空气中的水分而潮解和吸收CO2使表面变质;浓盐酸因易挥发而无法准确称量;高不易得到分析纯级的试剂等,这些物质的标准溶液须用间接法来配制,经标定后再做标准溶液使用。