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Caspase 1 活性检测试剂盒(Caspase 1 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 1酶活性或纯化的caspase 1酶活性的试剂盒。
Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也称interkeukin 1b conberting enzyme(ICE),有时被写作caspase-1或caspase 1,是caspase家族中唯一可以剪切IL-1b前体蛋白或IL-18前体产生相应成熟的细胞因子的caspase。Caspase 11可以剪切45kD的caspase 1前体蛋白,产生20kD和10kD的片段,这两个片段可以形成异源二聚体(heterodimer),并进一步由两个异源二聚体形成四聚体。Caspase 1可以通过剪切其凋亡Bcl-XL来调节细胞凋亡,并通过其对一些细胞因子前体的剪切来调控相关免疫反应。
本caspase 1活性检测试剂盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 1的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 1催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 1酶活性的标准品。
本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| C1101-1 | 裂解液 | 8ml |
| C1101-2 | 检测缓冲液 | 8ml |
| C1101-3 | Ac-YVAD-pNA(2mM) | 200μl |
| C1101-4 | pNA(10mM) | 200μl |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,Ac-YVAD-pNA和pNA需避光保存。
注意事项:
须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405,如有困难可以测定A400。
Ac-YVAD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。
测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006),可向碧云天订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
pNA(中文名为4-硝基·苯胺)对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
本试剂盒的裂解液可以和碧云天生产的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用,即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于碧云天其它caspase活性检测试剂盒的检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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