猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-M)核酸检

猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-M)核酸检测试剂盒(双重荧光-PCR法)客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
    10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM）   
              2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
  1 μl      加ddH2O至 50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)    48T/96T    Capra hircus; Caprine (Goat)
基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)    48T/96T    Equus caballus; Equine (Horse)抗His标签鼠单克隆抗体（可提供标记服务）
抗GST标签鼠单克隆抗体（可提供标记服务）
抗Beta Actin鼠单克隆抗体（可提供标记服务）
抗Beta Actin兔多克隆抗体（可提供标记服务）
抗GAPDH鼠单克隆抗体（可提供标记服务）
抗GAPDH兔多克隆抗体（可提供标记服务）
Western Blot与IP细胞裂解液（可提供标记服务）
BCA蛋白定量检测试剂盒（可提供标记服务）
彩色预染蛋白分子量标准(10-180 kDa)（可提供标记服务）
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒（可提供标记服务）
PBS (Phosphate Buffered Saline, pH7.5, 10x)（可提供标记服务）
AuraECL化学发光检测试剂盒（可提供标记服务）
RIPA裂解液（强）（可提供标记服务）
Bradford蛋白定量检测试剂盒（可提供标记服务）
彩色预染蛋白分子量标准(10-250 kDa)（可提供标记服务）
SDS-PAGE电泳液（粉剂）（可提供标记服务）
PBST (Phosphate Buffered Saline Tween-20, pH7.5, 10x)（可提供标记服务）
AuraECL Plus化学发光检测试剂盒（可提供标记服务）
RIPA裂解液（中）（可提供标记服务）
蛋白标准溶液（BSA）（可提供标记服务）
彩色预染蛋白分子量标准(40-300 kDa)（可提供标记服务）
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（2×，还原）（可提供标记服务）
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5×，还原）（可提供标记服务）
TBS (Tris Buffered Saline, pH7.2, 10x)（可提供标记服务）
AuraStain SP鼠/兔IHC试剂盒（可提供标记服务）
TMB底物显色试剂盒（可溶型）（可提供标记服务）
RIPA裂解液（弱）（可提供标记服务）
蓝色预染蛋白分子量标准(20-120 kDa)（可提供标记服务）
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5×，非还原）（可提供标记服务）
TBST (Tris Buffered Saline Tween-20, pH7.5, 10x)（可提供标记服务）
RIPA裂解液（强中弱套装）（可提供标记服务）
考马斯亮蓝染色液（常规法）（可提供标记服务）
SDS-PAGE凝胶电泳缓冲液 (10x)（可提供标记服务）
猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-M)核酸检测试剂盒(双重荧光-PCR法)AuraStain SP鼠IHC试剂盒（可提供标记服务）
丽春红染色液（可提供标记服务）
NP-40裂解液（可提供标记服务）
考马斯亮蓝染色脱色液（常规法）（可提供标记服务）
SDS-PAGE凝胶转膜缓冲液(10x)（可提供标记服务）
蛋白示踪上样缓冲液（还原，5×）（可提供标记服务）
产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的： 1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。 2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。