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100
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上海研生
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50T
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
荧光定量PCR原理:
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/APC APC标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE PE标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/APC APC标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Bio 生物素标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗兔IgG 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Gold 胶体金标记的羊抗兔IgG 0.5ml
Goat Anti-rabbit IgG/FITC FITC标记的羊抗兔IgG 0.3ml
Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗兔IgG 0.3ml
Goat Anti-Chicken IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗鸡IgG 0.3ml
Goat Anti-Chicken IgG/Gold 胶体金标记的羊抗鸡IgG 0.5ml
Goat Anti-Chicken IgG/FITC FITC标记的羊抗鸡IgG 0.3ml
肝胰腺细小病毒(HPV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)Goat Anti-Chicken IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE PE标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/APC APC标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Bio 生物素标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
Goat Anti-human IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG 0.1mlPCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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文献和实验实验目的:对RNasin性能效果进行检测及评估。 实验材料及设备: 模板RNA:大鼠肌肉组织RNA 引物:Rat β-acting:Forward CCCATCTATGAGGGTTACGC Reverse TTTAATGTCACGCACGATTTC RNase:50mg/ml(simgen) RNasin:40U/µl cDNA第一链合成试剂盒(simgen)、2×SYBR Green PCR mix(simgen) 设备:ABI 7000 荧光
荧光是自然界常见的一种发光现象,通过激发光进行激发,进而发射出比激发光波长长的发射光。荧光成像的理论基础是荧光物质被激发后所发射的荧光信号的强度在一定的范围内与荧光物质的量成线性关系。荧光成像系统包括荧光信号激发系统(激发光源、光路传输组件)、荧光信号收集组件、信号检测以及放大系统(CCD、PMT)。 实验原理: 荧光成像的标记方法有两种。一种是荧光蛋白的标记方法,与生物发光类似,将荧光蛋白基因作为报告基因,连接于启动子下游,稳定整合到细胞染色体内。另一种则是荧光染料标记好细胞或药物
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。 1、仪器设备 超净工作台、PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析系统、台式离心机、旋涡混悬器等。 2、实验试剂 选用美国Stratagene公司生产的支原体检测试剂盒(内有引物、阳性
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