
荧光Fluorescent Western检测实验
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- 荧光Fluorescent Western检测实验
- 北京
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
中研生物
- 服务名称:
荧光WB检测实验
- 规格:
样本
荧光Western blot使用荧光染料标记的二抗进行检测,膜上的靶标蛋白浓度与可见荧光信号强度呈线性关系,实现真实可靠的定量分析。荧光染料发射光谱不同,因此在一张印迹膜上可实现多重检测。在无需剥离和二孵育条件下,进行上样量质控,可以分析翻译后修饰蛋白。
荧光和普通的化学发光比较有很多优势。传统的化学发光是动态信号,信号随时间会变化,而且信号与目标蛋白浓度不成比例关系。而荧光信号则不随时间变化,信号与目标蛋白浓度成比例关系,这样定量更准确。
适用范围
1、 同时检测多种蛋白
2、 研究翻译后修饰蛋白
3、同一印迹膜的上样质控
4、精确定量western blot实验
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文献和实验方法也不同,常用的检测系统有化学发光检测(ECL)和化学显色 DAB 检测系统。 化学发光检测(ECL): 利用 HRP 催化化学发光物质,生成一种不稳定的中间物质,其衰变时在暗室内形成明显的肉眼可见的化学发光带,利用 X 胶片感光 原理,将结果记录下来。 ECL 显色试剂配制:化学发光底物 A 和 B 按照 1:1 比例等体积混匀。 将混合好的显色底物覆盖印迹膜 1-5 min,黑暗条件下观察荧光效果。 在暗室可用放射自显影胶片或化学发光成像系统记录结果 。 如采用放射自显影胶片,曝光几秒
5,6次总可以 zhangyuxianggx 首先感谢2楼的回复。但是还想问一下,封闭时加0.3%的叠氮钠目的是什么呢?我从来没加过,并且抗体都是用TBST稀释的,不知是不是有影响? 我前几次做的膜是孵的荧光二抗,到Odesay上看结果时,背景总是很杂乱,一片红红绿绿的,还有很多杂点,找不出是什么原因 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微
来自芝加哥大学癌症生物研究所,本-梅癌症研究中心等处的研究人员发明了一种能同时检测大量蛋白的新方法,彻底改变目前我们进行癌症和其它疾病蛋白表达水平检测的技术面貌,这种新方法效果与传统的Western Blotting一样好,但是时间可以大大缩短,比传统Western Blotting快48倍。这一研究成果公布在《Nature Methods》杂志上。这种称为“micro-western arrays”(微印迹分析)的方法能将蛋白检测常用实验:Western blot的特异识别能力,和DNA芯片检测
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