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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冰袋冷藏低温运输,-20℃,避光储存
- 保质期:
有效期36个月
- 英文名:
/
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- CAS号:
/
- 规格:
500 μL
黑胶虫清除剂
产品描述
“ 黑胶虫”是一种常见的细胞污染物,与细胞竞争性生长,对细胞生长不利,严重时导致细胞死 亡。 目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象,对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。
“ 黑胶虫”污染的细胞常见的特性有以下几点:
⑴ 培养基不浑浊,但在显微镜下观察细胞时,细胞周围和培养液中有很多“小黑点” ,且随着培 养时间的延长“ 小黑点”逐渐增多,更换培养液或洗涤细胞不能将其去除;
⑵“ 黑胶虫”污染的细胞,营养消耗快,需要频繁更换培养液;
⑶“ 黑胶虫”污染的细胞生长缓慢,细胞状态差,空泡化严重,甚至还可能导致细胞形态的改变。 黑胶虫清除试剂用于清除细胞培养过程中产生的“ 黑点” ,只需 1-3 天就可以显著抑制“ 黑点”
生长,一周左右即可清除“ 黑点”。
本产品经过细胞库上百种细胞的测试和长期的实验验证,对细胞生长无明显影响,具有高效、 特异性杀灭的特点,可显著清除黑胶虫污染,最 程度上挽救珍贵的细胞。
质量控制
通过细菌、真菌、支原体、 内毒素检测。
通过渗透压、pH 检测。
通过产品性能检测。 运输与保存方法
冰袋运输。
-20℃ 避光保存,保质期 18 个月。
使用方法
从-20℃冰箱内取出黑胶虫清除剂,将试剂管瞬时离心(3000 rpm ,3~5 s)后放置于 EP 管架上,用 75%的酒精喷洒试剂管的表面,在生物安全柜中进行无菌操作;
以 T25 细胞培养瓶为例
对于黑胶虫污染的细胞,在细胞培养基中加入适量黑胶虫清除剂,通常推荐使用的稀释倍数为
2000× , 如:6 mL 的细胞培养基加入 3 μL 的黑胶虫清除剂混匀。连续加药培养 1-2 周即可有效清除黑胶 虫污染。
若黑胶虫污染较严重,可酌情增加药物浓度以提高清除黑胶虫的效率,推荐尝试最小稀释倍数、
中间稀释倍数、最大稀释倍数三个浓度进行测试。以细胞系(成纤维样)为例,建议将细胞分为三份, 分别采用 500× 、 1000× 、2000×三个浓度进行黑胶虫清除,若 500×对细胞生长无明显影响,建议采用 500×清除黑胶虫,若 500×对细胞生长有明显影响,则采用 1000×清除黑胶虫,连续加药培养 1-2 周即可 有效去除黑胶虫污染。
注意:可参考下表选择稀释倍数,达到最佳清除效果。
细胞对药 物敏感度
细胞系(成纤维样)
细胞系(上皮样)
原代细胞(成纤维样)
原代细胞(上皮样) ♥♥♥ 干细胞 ♥♥♥♥♥
细胞举例
293T 、Raw264.7 、HT22、
3T3-L1 、HSF 、C2C12 、L929
MCF-7 、Hep G2 、Hela 、HUVEC、 皮肤成纤维细胞、间质细胞
肝内胆管上皮细胞、
脐静脉内皮细胞、肿瘤细胞 H1 、H9 、iPS、MSC
推荐
稀释倍数
500×~2000×
1000×~2000×
1500×~2000×
4000×~5000×
特别提醒
①使用本试剂前请仔细阅读说明书;
②本产品经 0.1 μm 过滤除菌,使用本产品时无需过滤,可直接加入培养基使用;
③本试剂具有专利技术,-20℃保存时不冻结,使用时无需解冻,直接从-20℃取出即可使用,不 会出现反复冻融析出现象;
④为了发挥 好的药效,含药培养基建议现配现用,如果加药培养基未用完,于 4℃冰箱中避光保 存,2 周内用完,使用培养基前需预热至 37℃;
⑤大部分的黑胶虫存在于细胞表面和细胞间隙。细胞换液或传代前,用无菌 PBS 轻轻冲洗细胞表 面 2-3 次,可将部分黑胶虫去除。
⑥黑胶虫直径小于细胞直径。传代后,500 rpm 低速离心,容易将细胞和黑胶虫分离,弃上清即可 祛除部分黑胶虫,铺细胞需更换为新的瓶/板;
⑦细胞老化或状态异常时会产生黑色的细胞分泌物,此种分泌物会随着细胞培养不断产生,无法 通过黑胶虫清除剂有效去除;
⑧如遇个别细胞对本试剂敏感,细胞生长速度明显受影响时,建议减量使用或进行稀释度测试;
⑨黑胶虫清除剂处理后,会有很好的清除黑胶虫效果,但是如果环境或使用试剂中仍有污染源存
在,细胞可能会再次污染,因此需做好适当的预防措施;
⑩加入本产品进行黑胶虫预防和清除时,无需添加双抗(青霉素-链霉素);
⑪为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
⑫本产品仅供研究或进一步生产使用,不得用于诊断或治疗。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data
期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
进行培养,生长快,很快铺满,仔细观察也可以见到少量的黑点。后来还有从军科院过来的Hela细胞,没有使用我们的血清,直接吸出多余的培养液后,进行培养,传代后用原来吸出的培养液进行培养,同样发现了问题。可以发现如下的特点:(1)与细胞共生,细胞长的好或密度大的话,小黑点就少,反之则 多;(2)对抗生素无效;(3)可能通过培养箱空气进行污染;(4)单用培养液及血清培养没发现问题。(5)换掖冲洗后也无效。以下是论坛里我找来的相关帖子内容:“黑胶虫”是近十几年才发现的一种细胞污染物,“黑胶虫”的分类目前尚无
少量的黑点。后来还有从军科院过来的Hela细胞,没有使用我们的血清,直接吸出多余的培养液后,进行培养,传代后用原来吸出的培养液进行培养,同样发现了问题。黑焦虫的特点:1、与细胞共生,细胞长的好或密度大的话,小黑点就少,反之则多。2、对抗生素无效。3、可能通过培养箱空气进行污染。4、单用培养液及血清培养没发现问题。5、 换掖冲洗后也无效。以下是论坛里我找来的相关帖子内容。“黑胶虫”是近十几年才发现的一种细胞污染物,“黑胶虫”的分类目前尚无鉴定确认。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中
摘要:预防和避免污染是细胞培养成功的关键,黑胶虫(也称黑焦虫)是近几年来几乎出现在每个细胞培养实验室。但是现在无法对黑胶虫的确认和鉴别,导致学术界说法不一,笔者收集了关于黑胶虫的资料,对黑胶虫进行类系统描述,对黑胶虫出现的情况对细胞培养的影响以及黑胶虫污染后的有效处理进行介绍。(Grade 2005, Biotechnology, School of Life Science and Engineering)Abstract Pollution prevention is the key
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