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产品基本信息
货号:17038
产品名称:Cy5-dATP
规格:25 nmoles
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:24个月
产品物理化学光谱特性
分子量:1182.05
溶剂:水
激发波长(nm):651
发射波长(nm):670
消光系数(cm-1 M-1):250000
荧光量子产率:0.27(PBS),0.4(乙醇)
校正因子 (280 nm):0.03
产品介绍
染料修饰的脱氧腺苷5'-三磷酸酯广泛用于各种非放射性DNA标记反应,包括切口平移,随机引物标记,cDNA标记和3'-末端标记。 Cy5-dATP可用于通过常规酶促掺入方法(例如逆转录,缺口翻译,随机引物标记或PCR)产生含Cy5的DNA。这种酶促荧光标记方法用于FISH探针和基于微阵列的实验。此Cy5-dATP缀合物可与SpectrumFRed 滤波片组一起用作红色荧光色(SpectrumFRed 是Vysis的商标)。它在功能上等同于Cy5-dATP(珀金·埃尔默(Perkin Elmer)的NEL593001EA),稳定性大大提高。
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文献和实验nm激光激发(图 1)。当同时用 PerCP-Cy5.5 和 APC 对细胞进行染色时,PerCP-Cy5.5 在 635 nm 激发范围产生的信号就会对 APC 的信号产生干扰,尤其是当 APC 染色的抗原表达水平较低的时候,从而影响实验结果。而用美天旎的 PE-Vio®615 染料去替换PerCP-Cy5.5 可以很好地解决这个问题,因 PE-Vio®615 不会被 635 nm 激光激发(图 1)。 图 1:PerCP-Cy™5.5 会被 635 nm 激光激发, 而PE-Vio®615
光染料在同一激光激发的染料中选择时,优先选择亮度高的染料,以保证最佳分辨率。常用的高亮度染料有PE、PE/Cy5、PE/Cy7、APC、PerCP/Cy5.5、AlexaFlour 647等,但是并不是说染料亮度高,在您的流式细胞仪上就能获得较好的信号,这还需要您的仪器的配备合适的激光、滤光片和探测器。 2) 平衡抗原表达水平和染料荧光亮度 在单色流式检测实验中,我们通常会选择亮度最强的几种染料,如PE、APC等等。但是,在多色流式检测时,有时因为颜色的限制不得不用到一些亮度
ORNL MICROARRAY HYBRIDIZATION PROTOCOLS
Direct labeling of total RNA with Cy3 and Cy5: A. MATERIALS RNeasy® Mini Kit (Qiagen; Cat # 74106) SuperScript II RT (200U/µL) (Life Technologies; Cat # 18064-014) QIAquick PCR Purification Kit (Qiagen; Cat # 28106)
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