ReadiUse 预激活的APC-iFluor 800串联染

简要概述

藻蓝蛋白（APC）是一种蓝藻藻螺旋藻中分离的藻胆蛋白。像其他藻胆蛋白一样，APC是荧光的，具有极高的吸收率和高量子效率。我们的APC-iFluor 800串联探针拥有一种独特的荧光团，具有用于光谱流式细胞术的IR发射。它的发射光谱不与任何常见的荧光团重叠，从而为流式细胞术中的多色应用提供了独特的颜色。 ReadiUse 预活化的APC-iFluor 800串联蛋白是一种活化的APC蛋白，可以轻松偶联到抗体上，具有比常规APC串联更高的结合产率。

产品说明书

样品分析方案

使用Buccutite MTA制备预激活的抗体

1.在DMSO中以约10 mg / mL的浓度重新配制Buccutite MTA。
注意，请将未使用的Buccutite MTA储存在-20°C下，并且最多可以使用两个冷冻和融化循环。
2.制备浓度大于1 mg / mL的pH = 8.5-9.0缓冲液中的目标抗体（Ab）。
3.以8-10 µg Buccutite MTA / 100 µg Ab的比例将Buccutite MTA添加到Ab溶液中。
4.充分混合并在室温下反应60分钟，在反应过程中旋转。
5.用脱盐柱纯化反应混合物，以除去未反应的Buccutite MTA，并将缓冲液更换为PBS或您选择的缓冲液。
6.收集Buccutite MTA活化的Ab，并以原始起始量的70％产率估算浓度。

 

预激活的APC-iFluor 800串联染料

1.在100 µL ddH₂O中将预活化的APC-iFluor 800串联染料重构为10 mg / mL。
注意，重建的预激活APC-iFluor 800串联染料可以在4°C下保存一个月，并避免光照。
2.以130 µg APC-iFluor 800串联染料 / 100 µg MTA激活的Ab的比例直接将APC-iFluor 800串联染料加入MTA激活的目标Ab溶液中。
3.在室温下将混合物离心60分钟。
4.Ab / APC-iFluor 800串联缀合物已经可以使用了。
注意，抗体缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在的情况下以> 0.5 mg / mL的浓度保存。 Ab / APC-iFluor 800串联缀合物溶液可以在4°C下保存长达两个月，并避免光照。
（可选）Ab / APC-iFluor 800串联缀合物可以通过尺寸排阻色谱法（SEC）进一步纯化以获得最佳性能。