- ￥150 - 650
- 普利莱
- C1051-100/500
- 北京
- 2025年12月24日
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大量
- 英文名：
Cell and Tissue Lysis Buffer
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京普利莱
- 保存条件：
4°保存
- 规格：
100ml/500ml
| 规格： | 100ml | 产品价格： | ￥150.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml | 产品价格： | ￥650.0 |
C1051 组织细胞裂解液
描述：组织细胞裂解缓冲液，为您提供完整的组织、细胞总蛋白制备方案，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。裂解液中含有去氧胆酸钠和EDTA，裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
储存：4℃保存。
制备细胞裂解产物：
1.800g 4℃离心 5 分钟收集培养细胞，估计细胞离心后的体积（PCV, 106 cells=~20ul, 107 cells=~100ul PCV）；
2.每 50～100ul PCV 加入 5 倍体积组织细胞裂解缓冲液（250~500ul）,冰浴放置 10 分钟，每隔 5 分钟在漩涡混合仪上振荡 30 秒；
3.12000g 4℃离心 10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物；
注意：假如所得蛋白产物较为粘稠，可先95℃加热5 分钟，迅速冰浴5 分钟，然后再进行步骤3
制备组织裂解产物：
1.取 50-100 mg 组织在冰上剪成碎片，用预冷的 PBS 洗涤 2 次离心弃去 PBS；
2.加入 0.5-1 ml 预冷的组织细胞裂解缓冲液；
3.4℃用玻璃匀浆器匀浆 20-40 次，直到 95％的细胞被破碎，然后在冰浴中放置 10 分钟，并每隔5 分钟在漩涡混合仪上振荡 30 秒；
4.12000g 4℃离心 10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物；
注意：假如所得蛋白产物较为粘稠，可先95℃加热5 分钟，迅速冰浴5 分钟，然后再进行步骤4
说明：
1.在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物；
2.在做免疫沉淀时最好在实验前进行蛋白的提取，以避免某些不稳定蛋白的降解；
3.在该裂解缓冲液中未加入蛋白酶抑制剂，用户可自行选择进行添加。
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文献和实验- Weng J, Han X, Liu K, et al. CD44 3'-untranslated region functions as a competing endogenous RNA to enhance NK Sensitivity of Liver Cancer Stem Cell by Regulating ULBP2 Expression[J]. International journal of biological sciences, 2019, 15(8): 1664.
- Tong X, Gu J, Chen M, et al. p53 positively regulates osteoprotegerin-mediated inhibition of osteoclastogenesis by downregulating TSC2-induced autophagy in vitro[J]. Differentiation, 2020, 114: 58-66.
- Zhang H, Xie Z, Zhao Y, et al. Endothelial cell derived microvesicles modulate cerebrovascular and brain aging via miR-17-5p and serve as potential biomarkers for vascular aging[J]. bioRxiv, 2023: 2023.02. 02.526751.
- Pang Y, Zhang L, Liu Q, et al. NRF2/PGC-1α-mediated mitochondrial biogenesis contributes to T-2 toxin-induced toxicity in human neuroblastoma SH-SY5Y cells[J]. Toxicology and Applied Pharmacology, 2022, 451: 116167.
在 argarose 的 beads 上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads 上的 prorein A 就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 二、实验步骤 免疫共沉淀反应： 1. 转染后 24～48 h 可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解 30 min，细胞裂解液于 4 °C，最大转速离心 30 min 后取上清。 2. 取少量裂解液以备 Western blot 分析，剩余裂解液加
肿瘤情况，又兼具了细胞系的可传代、易于高通量筛选等特性。因此，CRC 类器官模型正在广泛应用于药物研究、个性化医疗等领域。 本篇文章基于 Nature Chemical Biology【4】、STAR protocols【5】、Nature protocols【6】和 Cell【7】发表的四篇文章，整理了人类结直肠癌组织来源的类器官培养方案。 图 1. 病人组织来源的 CRC 类器官研究方案【8】 细胞来源 活检样本或手术样本 培养基配方 解离培养基 类器官培养基 红细胞裂解液
7.4 * NP-40: 1% * 去氧胆酸钠：0.25% * NaCl: 150 mM * EDTA: 1 mM * PMSF: 1 mM * 抑蛋白酶肽，亮抑酶肽,胃蛋白酶抑制剂: 各1 μg/ml * Na3VO4: 1 mM * NaF: 1 mM 三、实验流程为： （1）转染后24-48 h 可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C，最大转速离心30 min后取上清； （2）取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液加1μg相应
