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文献和实验真爱满行囊 我最近在体外细胞做的关于gsk3-beta功能问题,发现药物处理以后,gsk-3-beta的总表达量下调,如果是这样的话 1、我是否能够得出gsk-3-beta的活性下调的结论? 2、是否还有必要做非活性形式的表达量?我的理解是,基础状态下,gsk-3beta维持的是低活性状态,如果总量都下调了,那应该能够得出活性降低的结论了吧? 3、另外,在这种情况下我是否有必要去做gsk-3-beta的216位点的活性形式的表达
Western Blotting with Horseradish Pe
). 2.Aspirate excess PBS. 3.Add 1ml boiling 2X concentrated electrophoresis sample buffer (125mM Tris pH 6.8, 4% SDS, 10% glycerol, 0.006% bromophenol blue, 1.8% beta-mercaptoethanol). 4.Scrape cells from dish, transfer to a microcentrifuge tube, and boil
Beta-gal Assay Adapted from Current Protocols in Molecular Biology 1. Grow 5ml YEPD cultures to mid-log phase. 2. Centrifuge and resuspend cells in 5ml Z-buffer, then place on ice. 3. Measure OD600. 4. Use straight
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