小鼠结肠炎模型构建

一、常见构建方法及作用机制

1. DSS（葡聚糖硫酸钠）模型

   • 机制：DSS破坏肠道上皮细胞紧密连接和基底膜，增加肠道通透性，促进细菌产物渗入黏膜下层，激活固有免疫系统（如巨噬细胞、中性粒细胞），释放TNF-α、IL-6等促炎因子。
   • 适用场景：模拟溃疡性结肠炎（UC），尤其适合研究先天性免疫反应和黏膜修复机制。

2. TNBS（三硝基ben磺酸）模型

   • 机制：TNBS作为半抗原与肠道蛋白结合形成完全抗原，引发Th1/Th17型免疫反应，伴随IFN-γ、TNF-α升高，类似克罗恩病（CD）的透壁性炎症。
     
     
   • 适用场景：研究T细胞依赖性免疫反应和Th1/Th17通路。

3. 恶唑酮（Oxazolone）模型

   • 机制：通过Th2型免疫反应介导，IL-4和IL-5显著升高，炎症局限于黏膜浅层，更接近人类UC的病理特征。
   • 适用场景：评估Th2靶向药物及黏膜局部免疫调控。

二、具体给药方案与优化策略

注意事项：

• DSS溶液需每日更换，过滤除菌，避免微生物污染。
• TNBS灌肠需控制乙醇浓度（30-50%），过高易致肠穿孔。
• 恶唑酮致敏阶段需避免皮肤损伤，防止非特异性炎症。

三、模型评估指标

1. 表型指标

   • 疾病活动指数（DAI） ：综合体重下降（0-4分）、粪便性状（0-4分）、便血（0-4分），总分0-12分。
   • 结肠长度：急性模型缩短>15%，慢性模型更显著。
   • 脾脏重量：免疫激活时脾脏增大。

2. 组织病理学评分

   • H&E染色：评估隐窝结构破坏、炎症细胞浸润深度（黏膜层至浆膜层）、溃疡面积。
     
     
   • Dieleman评分：0-14分，涵盖炎症程度、病变深度、隐窝破坏和范围。

3. 分子标志物

   • ELISA检测：TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ等。
   • 免疫组化/Western blot：紧密连接蛋白（Occludin、Claudin-1）、自噬相关蛋白（LC3B、Beclin1）。