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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Shanghai Model Organisms Center, Inc.
- 库存：
1
- 供应商：
上海南方模式生物科技股份有限公司
- 规格：
品系
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文献和实验。(5) 其他：自剪切多肽2A(self-cleaving 2A peptide,2A) ：平均长度为18-22个氨基酸，2A上下游的基因同时转录，同时翻译，翻译后的肽段在2A的最后一个脯氨酸断开，最终分别得到一个融合有2A肽尾巴的上游蛋白和一个N端带有一个脯氨酸的下游蛋白。优点：2A 肽结构短小并且上下游基因的表达平衡性好；缺点：不同基因不同细胞中2A断裂效率有所不同。 内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)：IRES元件具有不依赖帽子结构而独立募集核糖体的功能
； G418 筛选要有耐心：起效慢，空白对照彻底死亡需要更久，期间容易低估药物强度； blasticidin 杀伤力强：维持浓度要更低，否则阳性细胞也压不住。 --- 二、抗性基因在载体上的位置，决定药筛的成败 同一个抗生素，在不同载体结构下表现可能完全不同——这是药筛出问题时最容易被忽略的一层： 载体结构 抗性表达强度 药筛表现 抗性基因由强启动子独立驱动 强 筛选顺利 抗性基因位于 IRES 之后 弱 荧光阳性细胞也可能被杀死，需要降低药量 抗性基因与目的基因 2A 连接 较强
大基因做慢病毒总是滴度低？先换成大基因专用载体 GV747 再说
、抗性、2A/IRES和其他调控元件一起算进去。越靠近载体能力边界，越应该在正式包装前做小规模验证，而不是只看理论容量。 容量账怎么算（对照表） 载体类型 理论总容量 必需元件占用 目的基因可用空间（经验值） 备注 常规慢病毒载体 约 8-9kb 约 2.5-3kb 约 2.5-4kb 表现最稳 超过 4kb 滴度下降明显 大基因专用载体 GV747 优化骨架，缩减冗余元件 明显低于常规骨架（具体以官方为准） 4-5kb 为主力区间 ≤5kb 承诺滴度与出毒 GV747 用于
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
