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北京维通达生物技术有限公司
动物品系
F1代小鼠：常用的品系有B6D2F1，B6SJLF1，CD-1XFVB和CD-1XC57BL/6等。杂种品系的优势是成功率高，繁殖力强，存活率高，可以较快的获得Founder。对于较难制作的转基因均采用F1代胚胎获得founder，然后再回交到需要的背景。
C57BL/6小鼠：目前公布的小鼠基因组测序结果来源于C57BL/6小鼠品系。该品系小鼠模型已广泛应用于肿瘤、免疫、遗传学等方面的研究， 并已成为常用的标准品系之一。但转基因的效率相对较低，且C57BL/6生性好斗，易发生意外。
FVB小鼠：原核大、清晰、近交品系，基因型比较单一；具有易于原核注射的优点。
SD大鼠：常用的大鼠模型，适用于安全性评价、衰老、免疫和癌症等方面研究。
（1）过表达转基因大（小）鼠
构建上述常规的带有启动子和目的基因的表达载体， 利用原核显微注射的方法将表达载体注射到小鼠受精卵中。通过构建广泛性/组织特异性/诱导性等不同的启动子，实现转基因在小鼠组织广泛性/特异性/特定条件下等的表达，达到对目的基因功能的研究目的。
（2）shRNA转基因大（小）鼠
通常采用U6/H1驱动shRNA表达，设计靶序列构建shRNA载体，利用原核显微注射的方法将shRNA载体注射到受精卵中。shRNA被加工成siRNA干扰沉默目的基因，实现基因功能的研究。
（3）microRNA转基因大（小）鼠
构建上述两种microRNA过表达和下调载体，通过原核显微注射将载体注射到受精卵中，通过基因表达，实现microRNA过表达或者下调。
（4）可诱导性/组织特异性转基因大（小）鼠
将构建的广泛表达启动子-loxp-stop-loxp-转基因载体，通过显微注射制备组织特异性转基因大（小）鼠模型，转基因在正常情况下并不表达， 只有与相应的组织特异性表达Cre/CreERT2小鼠杂交后，因Stop终止序列在特定的组织中被去除，从而达到转基因在特定组织中/诱导性特异性表达的目的。
（5）BAC转基因大（小）鼠
Bacterial artificial chromosomes（BACs）是以细菌F因子为基础构建的细菌克隆载体。由于其完整性和保真度，可以更好的表征体内转基因特征。因此，为了研究完整的时空特异性基因表达、基因结构及调控元件等，可以将BAC直接进行原核显微注射（约几十到几百Kb）或者将其改造后注射在小鼠或大鼠的受精卵中，以获得转基因鼠。
注意事项：
①每只F0代鼠基因型都不一样，不能进行F0之间的自交，只能先与野生型交配，筛选出基因型一致的F1。（假如F0代有多个位点的外源基因整合，F1还有可能有多种基因型）。
②获得F1鼠后，可以进行蛋白表达鉴定，优先筛选出表达的鼠后再进行后续的传代和保种。
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文献和实验10b基因连接到脂肪组织特异表达的FABP4启动子上，通过常规转基因技术获得转基因小鼠。在FABP4启动子调控下，转基因小鼠脂肪组织中Wnt10b表达比正常情况高50倍。Wnt10b基因在正常小鼠的白色和棕色两种脂肪组织内的作用不同，转基因小鼠只有正常白色脂肪的一半，而没有棕色脂肪，这使得它无法维持自身体温从而容易受到寒冷的攻击。研究人员无法解释这种转基因小鼠的皮肤比正常小鼠厚2倍，体重较重，耗氧量也较少，然而更奇怪的是它们活得都很健康。 脂肪组织负责产生机体响应胰岛素的leptin
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。 2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。 3、第二天上午9:00前观察供体、受体，有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。 4、10:30左右，断颈处死供体，手术取出整个输卵管，放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下，用镊子撕开输卵管壶腹部，受精
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。4、10:30左右，断颈处死供体，手术取出整个输卵管，放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下，用镊子撕开输卵管壶腹部，受精卵随同颗粒细胞即一同流出
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