上海裸鼠造模实验

一、定义与用途

裸鼠（Nude mice）因先天性胸腺缺失导致T淋巴细胞功能缺陷，具有免疫耐受性强的特点，能够接受异种组织或细胞移植而不产生明显排斥反应。其核心应用包括：

1. 肿瘤研究：构建人源肿瘤移植模型（如肝癌、胃癌、卵巢癌等），模拟肿瘤生长、转移及药物响应。
2. 免疫机制探索：研究免疫缺陷对疾病发展的影响，例如瘢痕疙瘩模型中的病理特征分析。
3. 药物评价：用于抗肿瘤药物、生物制剂（如重组人血管内皮抑素）的疗效及毒性测试。
4. 疾病机制建模：如糖尿病创面修复模型、子宫内膜异位症模型等非肿瘤领域应用。

二、实验步骤与关键技术

（一）实验准备

1. 动物选择：

   • 品系：常用BALB/c-nu/nu裸鼠，根据实验需求选择性别（如卵巢癌模型多用雌性）。
   • 年龄与体重：4-6周龄，体重18-22g为典型参数。
   • 饲养条件：SPF级环境，温度22-25℃，湿度45-60%，独立通风笼具（IVC）。

2. 细胞或组织处理：

   • 细胞系：选择对数生长期的肿瘤细胞（如SGC7901胃癌细胞），密度调整至1×10⁷-5×10⁷个/mL。
   • 组织块：新鲜肿瘤标本切成2-3mm³小块，PBS冲洗后移植。

（二）造模方法

1. 皮下移植模型（最常用）：

   • 细胞悬液注射：腋下或背部皮下注射0.1-0.2mL细胞悬液，7-10天可形成肉眼可见肿块。
   • 组织块包埋：通过套管针将肿瘤组织块植入皮下，缝合后观察生长。

2. 原位移植模型（模拟器官特异性微环境）：

   • 例如肝癌原位模型：麻醉后切开腹腔，将Huh7细胞悬液直接注射至肝左叶。
   • 需结合手术操作，术后需监测出血与感染。

3. 腹腔/胸腔模型：

   • 用于模拟转移性病灶或积液（如恶性胸腔积液模型），注射细胞后通过CT或解剖确认积液形成。

4. 特殊模型构建：

   • 糖尿病创面模型：STZ诱导糖尿病后，背部制造1.5cm²创面。
   • 子宫内膜异位模型：移植人子宫内膜组织至裸鼠盆腹腔，需结合卵巢切除以模拟激素环境。

（三）术后观察与评估

1. 肿瘤生长监测：

   • 测量瘤体长径（a）和宽径（b），计算体积公式：V=0.5×a×b²。
   • 成瘤标准：皮下肿块长径≥5mm（成功率约87.5%）。

2. 动物状态评估：

   • 观察饮食、活动度、体质量变化，记录并发症（如瘤体破溃、消瘦）。
   • 影像学检查：小动物X射线或CT用于评估骨破坏或胸腔积液。

三、注意事项

（一）技术关键点

1. 细胞活性控制：

   • 接种前需保证细胞活力＞90%，冰上保存悬液以避免贴壁。
   • 使用Matrigel胶增强细胞锚定，提高成瘤率。

2. 无菌操作：

   • 手术器械需高压灭菌，操作在超净台内完成，术后注射青霉素预防感染。

3. 环境管理：

   • 夏季需通风降温，冬季注意保温，避免温度波动影响模型稳定性。