- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-732116
- 中国
- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Staphylococcus pseudintermedius
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Staphylococcus pseudintermedius
本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测，可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因，进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域，不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较，本方法更为快速，特异性更高。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增伪中间型葡萄球菌序列，与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 伪中间型葡萄球菌PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 伪中间型葡萄球菌PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是伪中间型葡萄球菌PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 伪中间型葡萄球菌PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（伪中间型葡萄球菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验培养，按照Kloos等［1］方法再鉴定。 2 结果 2.1 菌种鉴定结果 金黄色葡萄球菌23株，中间型葡萄球菌28株，表皮葡萄球菌19株，溶血葡萄球菌15株，里昂葡萄球菌9株，人葡萄球菌7株，耳葡萄球菌7株，华纳葡萄球菌3株，其余是腐生葡萄球菌和柯氏葡萄球菌7株，共10种。 2.2 玻片法凝固酶重复试验结果 在限时操作的10秒种内，呈阳性反应者，23株金黄色葡萄球菌中有22株，28株中间型葡萄球菌中有25株，阳性反应准确
很好地发育，所以培养比较简单，但刚从动物体上分离的，对各种氨基酸和生长因子的要求较高，特别是对烟酸、硫胺素的要求更为明显。在自然界已发现许多介于 S． aureus与 S． albus中间型的种类。葡萄球菌是柯赫（ R． Koch． 1878）、巴斯德（ L． Pasteur， 1880）和奥格斯顿（ A． Og-ston， 1881）从浓液中发现的，但通过纯培养并进行详细研究的是 F． J． Rosenbach（ 1884）。在生理学上显有许多与大肠杆菌 -产气杆菌群（ coli-aerog
3周的孕兔和配种时的青年兔或成年兔及断奶前一周的仔兔，一律皮下或肌肉注射1毫升，7天产生免疫力，免疫期为6个月。 5．魏氏梭菌灭活苗 用于预防魏氏梭菌肠炎。对1且龄以上的兔皮下注射1毫升，7天产生免疫力，免疫期为4～6个月。种兔每年接种2次。 6．兔伪结核灭活苗 用于预防伪结核耶新氏杆菌病。对断奶前一周的仔兔及青年兔、成年兔一律皮下或肌肉注射1毫升，7天产生免疫力，免疫期为6个月。种兔每年接种2次。 7．沙门氏杆菌灭活苗 用于预防沙门氏杆菌病。对断乳前1周
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