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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Guinea Pig Herpes Virus
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Guinea Pig Herpes Virus
本试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测,可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因,进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域,不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较,本方法更为快速,特异性更高。
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增豚鼠疱疹病毒序列,与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL(亮黄色) |
| 豚鼠疱疹病毒PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL(白盖) |
| 豚鼠疱疹病毒PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 试剂四 | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是豚鼠疱疹病毒PCR 阳性对照的1000 倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 豚鼠疱疹病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(豚鼠疱疹病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验属于疱疹病毒科β病毒亚科。病毒粒子为100— 270毫微米的球状,最初分离到的病毒(豚鼠巨胞病毒)是由来于豚鼠,由科勒( R. Cole)和丘奈尔( A. G. Kuttner, 1926)发现的。一般多呈隐性感染,主要存在于下颌腺,因而也称下颌腺病毒( salivary glandvirus)。其特征是在唾液腺排出管的细胞核内形成包涵体,有时也在肾上皮细胞中形成包涵体。下颌腺细胞受感染后可显著肥大。除豚鼠外,还可从人(人体巨胞病毒)、猿猴(猿猴巨胞病毒)、鼷鼠(鼷鼠巨胞病毒)等分
单纯疱疹病毒(HSV): (1)生物学性状:单纯疱疹病毒为有包膜的DNA病毒,为双股线状DNA。该病毒能在多种细胞内增殖,如原代兔肾、人胚肺、人胚肾细胞或地鼠或肾细胞等。细胞被感染后很快发生病变。如细胞肿胀、变圆、出现嗜酸性核内包涵体医学教育网`搜集整理。该病毒可感染的动物种类较多,如家兔、豚鼠、小鼠等。该病毒有两种血清型,HSV-1和HSV-2.两型病毒的DNA有5%同源性。 …… 点击查看更多:bbs.med66.com/forum-267-250/topic
病毒学研究中常选用的实验动物有金黄地鼠、小白鼠、豚鼠、家兔、绵羊、禽类、猴等。分离病毒广泛使用的是乳鼠,它对柯萨基病毒、呼吸道病毒和虫媒病毒感染有很高的易感性。 选用实验动物不仅考虑它的易感性,还考虑接种途径,例单纯疱疹病毒的易感动物为家兔、豚鼠,接种途径分别是角膜、脑内和肉趾。 常见病毒敏感动物的选择:病毒易感动物的研究,一直是病毒学中的重要内容之一。实验动物在人类病毒学发展史上起重要作用,主要用作分离病毒、抑制病毒的药物筛选、疫苗效果及安全性鉴定、制备
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