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弧菌通用PCR试剂盒

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  • ¥2490
  • YBio/钰博生物已认证
  • 中国
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Vibrio spp.

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海钰博生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃保存

    • 规格

      50次

    弧菌通用PCR试剂盒
    Vibrio spp.
    产品简介:
    弧菌(Vibrio spp.)是菌体短小,弯曲成弧形,尾部带一鞭毛的革兰氏阴性菌。弧菌属广泛分布于河口、海湾、近岸海域的海水和海洋动物体内。该菌引起的食物中毒经烹饪不当的海产品或盐腌制品所传播。常见的为海蛰、海鱼、海虾及各种贝类,因食物容器或砧板生熟不分污染本菌后,也可发生食物中毒。该菌常年均可发生,可从自限性腹泻至中度霍乱样病症,有腹痛、腹泻、呕吐和低热,粪便多为水样,少数为血水样,恢复较快,病后免疫力不强,可重复感染,该菌还可引起浅表创伤感染、败血症等,给人体健康带来严重损害,因此弧菌检测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点:
    1.即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。
    2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增弧菌。
    3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
    4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
    5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
    6.本产品只能用于科研。

    产品细节图片1
    规格及成分:
    成 份 编号 十孔盒包装
    PCR MagicMix 3.0 90805 1 mL(亮黄色)
    超纯水 100935 1 mL(蓝色)
    弧菌通用PCR 引物混合液 13-14800yw 100 μL(白盖)
    弧菌通用PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) 13-14800pc 100 μL(黄
    天净沙DNA释放剂试用装 130982 50次(试用装)
    使用手册 13-14800sc 1份

    运输及保存:
    低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
    自备试剂:
    样本DNA。
    使用方法:
    一、样品 DNA 的制备
    1.如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
    2.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的天净沙DNA释放剂,本产品的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。

    二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
    3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

    成分
    样品管
    N+2 个
    PCR
    阴性对照
    PCR
    阳性对照
    PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
    弧菌通用PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
    N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -
    PCR 阴性对照 - 18 μL -
    PCR 阳性对照
    -

    -

    18 μL

    4. 按下表设置 PCR 反应:
    过程 温度 时间
    预变性 94℃ 5 min

    PCR 反应
    (35 个循环)
    94℃ 20sec
    58℃ 20sec
    72℃ 30sec
    最后延伸 72℃ 10 min
    产品细节图片2
    三、电泳检测
    5. 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。

     

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