产品编号: RC200108-100ML 存储条件: 2-8 ℃避光保存,有效期12个月。 产品简介: 本产品专为贴壁培养的人间充质干细胞传代设计,是即用型间充质干细胞消化液。主要功能成分为重组胰蛋白酶、EDTA。该产品消化人间充质干细胞较为温和,避免细胞因为剧烈的消化而发生老化和分化,与无血清培养基配合,在间充质干细胞治疗用研究中能有效保持细胞生物学特性。 适用于人间充质干细胞hMSCs,包括人骨髓间充质干细胞hBMSCs、人脂肪间充质干细胞hAMSC、人羊膜间充质干细胞hAD-MSCs、人脐带间充质干细胞hUMSCs等。同样适用于其他贴壁培养的哺乳动物细胞消化传代,包括293、Hela、NIH3T3等,具体使用时请自行分析判断对细胞类型的影响。 适用实验与操作过程: 1. 间充质干细胞消化 A. 细胞准备:将待消化的贴壁人间充质干细胞培养器皿置于超净工作台。 注:人间充质干细胞正常传代建议汇合度为90%左右,密度过大会导致细胞分化或老化。 B. 细胞清洗:吸弃培养上清,加入与培养液等量的PBS洗细胞一次。 注:若原代培养上清较粘稠,建议多洗几次,至洗液不在粘稠。 C. 细胞消化:弃去清洗细胞的PBS,加入适量的间充质干细胞消化液,轻轻摇动以使消化液均匀分布,室温水平静置消化1-2分钟。 注:加入消化液的量约为培养液体积的2/5,如T25细胞培养瓶加入2 ml,请以完全覆盖细胞为准。间充质干细胞消化液使用前必须室温复温。消化过程中可以进行显微镜观察,可见细胞很快回缩成圆形,轻轻震动培养器皿大多数细胞即可脱落。 D. 终止消化:加入2倍体积的间充质干细胞无血清培养基(RC200101),快速混匀以终止细胞消化。 E. 细胞收集:轻轻吹打细胞,使细胞从培养表面脱落。将细胞悬液移入离心管中,200 g离心5分钟,获得细胞沉淀。 注:状态良好的人间充质干细胞消化1-2分钟便可很容易脱壁,某些不易吹打脱壁的细胞建议舍弃。 2. 其他实验应用 A. 本产品可适用于组织细胞消化。如配合组织细胞消化液(RC200104)消化人羊膜,获取羊膜上皮细胞与羊膜间充质干细胞。 B. 本产品可适用于贴壁不牢的细胞消化。如用于消化293T、NIH2T2等细胞,可以更好保护细胞活性。