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- 2026年10月23日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海富雨
- 检测范围：
/
- 检测方法：
酶联免疫吸附试验法
- 应用：
检测
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
操作注意事项
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data
期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
。 LILRB4的结构与配体 LILRB4属于白细胞免疫球蛋白样受体（LILR）家族，定位于染色体19q13.4基因簇。该家族分为激活型（LILRA1-6）和抑制型（LILRB1-5）。LILRB4为抑制型受体，胞内区含较长尾部及免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIMs），可招募磷酸酶并传递抑制性信号，参与调控免疫应答。 LILRB4是一种I型跨膜蛋白，结构上由胞外域、跨膜域和胞内域三部分组成。其胞外域包含两个免疫球蛋白样结构域（D1和D2），形成独特的双Ig折叠结构，赋予其识别并结合多种配体的能力。跨膜区含有
在相同的酶。另外，它的相应底物易于制备和保存，价格低廉，有色产物易于测定等。 在ELISA中，常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。在少数商品ELISA试剂中，应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等。国产ELISA试剂一般都用HRP制备结合物。HRP是一种糖蛋白，含糖量约为18%，分子量为44000，是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合而成，是一种卟啉蛋白
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