上海流式细胞术

流式细胞术（Flow Cytometry）

1. 定义与特点

流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种对悬浮液中的单细胞或其他生物粒子进行高速、多参数定量分析和分选的技术。其核心特点包括：

• 高通量：每秒可分析数千至上万个细胞。
• 多参数检测：通过荧光标记同时分析细胞表面/内部分子（如抗原、DNA含量等）。
• 高精度：结合激光、流体力学和计算机技术，实现高灵敏度的信号采集。

2. 原理与步骤

核心原理：

• 细胞经荧光标记后通过流动室，激光激发荧光信号，通过散射光（反映细胞大小、形态）和荧光信号（反映分子表达）进行检测。

基本流程：

1. 样本制备：需单细胞悬液（如血液、组织消化液），避免细胞团块。
2. 荧光标记：使用抗体-荧光染料偶联物靶向特定抗原，或核酸染料（如PI）分析DNA含量。
3. 上机分析：调整仪器参数（流速、激光波长），获取散射光和荧光数据。
4. 数据分析：通过软件（如FlowJo）分群、统计，生成直方图或散点图。

3. 主要应用领域

• 免疫学：
  • 免疫细胞分型（如T/B/NK细胞）。
  • 细胞因子分泌分析、抗原特异性T细胞检测（MHC多聚体技术）。
• 肿瘤学：
  • DNA倍体分析、肿瘤干细胞鉴定。
  • 凋亡检测（Annexin V/PI双染法）。
• 细胞生物学：
  • 细胞周期分析（PI染色法）。
  • 活性氧（ROS）、线粒体膜电位检测。
• 临床诊断：
  • 白血病/淋巴瘤免疫分型、血小板功能检测。