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- 文献和实验
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RT
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见标签
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999
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
5ml

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文献和实验本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml,总量为6滴,相当于0.12ml。 一、材料 1、抗原 系各型菌株培养物多价抗原,按瓶签说明倍数稀释; 2、溶血素 正式试验时使用2个工作单位; 3、补体系冻干补体 用灭菌生理盐水作1:5基础稀释。在溶血素效价测定和补体效价滴定时均作1:60稀释,在正式试验时,用2个工作单位; 4、1%的红血球悬液 用灭菌生理盐水洗涤与配制。在使用时与等量含2个工作单位的溶血素液配成致敏红血球悬液; 5、阳性血清 正式试验时1:100稀释
沉淀洗涤三次,每次2000r/min,离心10min,然后去掉上清液,血球泥用生理盐水配成2.50%液应用。2、溶血素效价测定 溶血素是用绵羊红细胞,经多次免疫家兔,抽取家兔血清,加入甘油而成。在冰箱中可保存二年以上。每隔两、三个月测定效价一次。溶血素可从生物制品厂购买。溶血素效价测定的方法:先将溶血素稀释成100倍,即0.20ml的溶血素(溶血素实量含0.10ml)加入9.80ml生理盐水混合即可。然后按表1配成稀释液:表1 溶血素稀释表稀释
操作方法 (1)用1640营养液悬浮PBMC,计数后调整细胞浓度至2×106/ml。加入20孔塑料软板中,每孔10μl,每份标本加4孔; (2)分别加入抗CD3、CD4、CD8的McAb每孔10μl,同时设阴性对照。振荡混匀5s,放湿盒,37℃作用30min (3)加入新鲜兔补体,每孔40μl,振荡混匀5s,放37℃湿盒内作用60min; (4)加入5%伊红染料,每孔20μl,室温10min; (5)加入0.8%戊二醛
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