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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
见标签
- 库存:
现货
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
瓶装
形式
powder
分子量
precursor poly-L-lysine • HBr 30,000-70,000
30,000-70,000
标记范围
0.003-0.01 mol FITC per mol lysine monomer
颜色
yellow to orange
应用
cell analysis
储存温度
−20°C
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文献和实验/L碳酸盐缓冲液pH9.0,将欲标记免疫球蛋白稀释成1%浓度,装入透析袋中。 ②用同一缓冲液将FITC配成0.1mg/ml的溶液,按10mg/ml球蛋白溶液体积的10倍,将FITC稀释液盛于圆柱形容器内,并使透析袋浸没于FITC液中。 ③容器顶端盖紧,底部放搅拌棒,在4~C电磁搅拌下透析标记24h。取出透析袋中标记液,即刻用SephadexG50凝胶过滤,去除游离荧光素,分装,贮存于4℃中。
上述细胞。 (2)用含2% PBS不含甲硫氨酸的培养基悬浮杂交瘤细胞至106个/ml,加入35S甲硫氨酸(每次加入100uCi可产生105-106cpm的抗体)。 (3)经C02培养箱中培养过夜,离心后,吸出培养上清,分别加入1/20体积的1mol/L Tris(PH8.0)及叠氮钠至浓度0.02%。该标记抗体可按纯化单抗方法进行。 四、生物素标记 生物素标记反应常用生物素琥珀酰亚胺酯进行。生物素是与抗体分子的游离赖氨酸等发生偶联反应而完成标记。其主要步骤是: 1、用二甲基亚砜配制10mg
抗体浓度至10mg/ml。 (2)取5ml抗体溶液置于10ml小烧杯中。 (3)称取1mg FITC溶于0.2ml DMSO中,待溶解后立即缓慢滴加于抗体液内,边加边轻搅;其后室温避光作用2小时。 (4)将交联物经Sephadex G25或G50柱层析除去游离的荧光素;分管收集第一峰为标记的抗体。 (5)FITC的结合物质量鉴定 IgG量(mg/ml)=(OD280-OD495×0.35)/1.4 F/P=2.87×OD495
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