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常温
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见标签
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现货
- 供应商:
联硕
- CAS号:
208255-80-5
- 规格:
5mg
生化/生理作用
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文献和实验,5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基,将 iPSCs 接种于明胶上,添加 10ml iPSCs(I)培养基,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 定向内胚层分化 4、在 60mm 培养皿中加入 2ml Matrigel,室温静置 2h 并添加 DMEM-F12 培养基至完全没过 Matrigel。 5、用不含 Ca2+/Mg2+ 的 PBS 冲洗 iPSCs 后,加入 300μl Accutase,37℃ 孵育
ratio of 260 is equal to 40 g/ml of RNA. Store at -80°C in 1 mg aliquots, avoid repeat freezing and thawing.
液,加入6ml DMEM完全培养基,37℃孵育过夜,再换液。 7、培养过程中观察细胞生长情况。约2周后可观察到细胞病变(CPE)出现(如用pAdTrack-CMV质粒,由于含GFP,可观察到绿色荧光)。四、重组病毒鉴定 1、转导10-14d后,收集细胞沉淀,加入2ml灭菌的PBS混悬,冻融细胞,离心后收集上清保存于-80℃。 2、取30-50% 步骤1中上清,感染50-70%饱和度的25cm2方瓶中293细胞。2-3d后出现明显细胞病变。 3、感染后3-5d,当1/3-1/2细胞漂浮时
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