- ￥3300
- 赫澎生物
- HPBIO-JM3942-
- 上海
- 2025年11月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20次
- 保质期：
6个月
- 供应商：
赫澎生物
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
20次
产品内容
HEPENGBIO裂解液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO强化液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO缓冲液（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO反应液（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO底色液（Reagent E） 微升
HEPENGBIO补充液（Reagent F） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO反应液（Reagent D）和HEPENGBIO底色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO底色液（Reagent E）避免光照，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
微型台式离心机：用于样品制备
恒温水槽：用于孵育反应
比色皿或96孔板：用于反应和比色的容器
分光光度仪或酶标仪：用于比色分析
实验步骤
- 样品准备
-
- 准备好10毫升待测的新鲜真菌/酵母细胞（OD600＝0.4至0.8，即1至2 X 107细胞/毫升）
- 移入到预冷的15毫升锥形离心管
- 置于冰槽里5分钟
- 放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为1000g
- 小心抽去上清液
- 加入xx微升HEPENGBIO裂解液（Reagent A），充分混匀
- 转移到预冷的1.5毫升离心管
- 加入xx微升HEPENGBIO强化液（Reagent B）
- 强力涡旋震荡15秒
- 置于冰槽里1分钟
- 重复实验步骤9至10五次
- 加入xx微升HEPENGBIO裂解液（Reagent A），充分混匀
- 放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
- 小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管
- 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用HEPENGBIO BCA蛋白质浓度定量试剂盒－HEPENGBIO30031.1）
- 即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作
- 测定准备
- 准备好待测样品，置于冰槽里
- 设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长412nm，间隔10分钟，读数4次（共30分钟），并置零
- HEPENGBIO缓冲液（Reagent C）室温下均衡温度
三、背景对照测定
- 移取xx微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
- 加入xx微升HEPENGBIO底色液（Reagent E）
- 上下倾倒数次，混匀
- 在37℃温度下孵育3分钟
- 加入50微升待测样品（或100微克蛋白）（注意：样品须清澈）
- 上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）
- 即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照（30分钟读数－0分钟读数）
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- 样品测定
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- 移取xx微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
- 加入xx微升HEPENGBIO反应液（Reagent D）
- 加入xx微升HEPENGBIO底色液（Reagent E）
- 上下倾倒数次，混匀
- 在37℃温度下孵育3分钟
- 加入50微升待测样品（或100微克蛋白）（注意：样品须清澈）
- 上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）
- 即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数（30分钟读数－0分钟读数）
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- 计算样品活性
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六、酶标仪测定
- 在96孔板上做好相应标记：背景对照和样品
- 分别移取xx微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent C）到所有孔里
- 加入xx微升HEPENGBIO反应液（Reagent D）到样品孔里
- 加入xx微升HEPENGBIO阴性液（Reagent F）到背景对照孔里
- 分别加入xx微升HEPENGBIO底色液（Reagent E）到所有孔里
- 轻轻摇动96孔板
- 在37℃温度下孵育3分钟
- 分别加入10微升待测样品（或20微克蛋白）到所有孔里（注意：样品须清澈，且pH为7.2）
- 轻轻摇动96孔板
- 即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和30分钟读数
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文献和实验―――――――――――――――――― ×100% 血清AMY（U/L）×尿Cr（μmol/L） 3、淀粉酶同工酶测定 ⑴免疫抑制法：用抗体封闭同工酶S后测定同工酶P活性。 ⑵电泳法：醋酸纤维膜电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳等方法。 ㈣参考范围 1、血清（浆）AMY：＜220U/L（酶偶联法）或800~1800U/L（碘—淀粉比色法）。 2、尿液AMY：①随机尿：＜1000U/L（酶偶联法）或＜680U/gCr
C下烘干，或采用红外线烘干，也可在800C或400C下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在400C下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。3、 比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时
干酵母（activity dry yeast, ADY），一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。3、比浊法： 微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD
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