- ￥1680
- HEPENGBIO
- YX-W-B611
- 上海
- 2025年11月10日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
100T/48S
- 保质期：
6个月
- 供应商：
赫澎生物
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100T/48S
β-1,3 葡聚糖酶（β-1,3-GA）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：YX-W-B611
规格：100T/48S
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 3.5mL 双蒸水，充分溶解待用； 试剂二：液体 30mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：粉剂×1 支，4℃保存，含 10mg 无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入 1ml 蒸馏水溶解，配制成 10mg/ml 葡萄糖溶液备用，4℃可保存 1 周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至 1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。产品说明：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆
境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖速率来计算其酶活性。
称取约 0.2g 组织，剪碎，放入预冷的研钵中，加入 1.0 mL 提取液进行冰浴匀浆，12000g，4℃， 离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、样本测定，（在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂）：
货号：YX-W-B611
规格：100T/48S
产品内容：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 3.5mL 双蒸水，充分溶解待用； 试剂二：液体 30mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：粉剂×1 支，4℃保存，含 10mg 无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入 1ml 蒸馏水溶解，配制成 10mg/ml 葡萄糖溶液备用，4℃可保存 1 周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至 1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。产品说明：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆
境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖速率来计算其酶活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。操作步骤：
一、粗酶液提取：称取约 0.2g 组织，剪碎，放入预冷的研钵中，加入 1.0 mL 提取液进行冰浴匀浆，12000g，4℃， 离心 10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。2、样本测定，（在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 | 标准管 |
| 样本或标准液 | 35 | 35 | 35 |
| 双蒸水 | 35 | 35 | |
| 试剂一 | 35 | ||
| 充分混匀，放入 37℃水浴 60 min | |||
| 试剂二 | 230 | 230 | 230 |
β-1,3-GA 活性计算：
根据标准管吸光度（x）和浓度（y，mg/ml）建立标准曲线，将ΔA 带入公式中计算出样品中产生的还原糖的含量 y 值（mg/ml）- 按蛋白浓度计算
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr
- 按样本鲜重计算
β-1,3-GA(U /g 鲜重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每 1 万个细胞或细菌每小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(U /g 鲜重)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1：加入反应体系中样本体积，0.035mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度， mg/mL；W：样本鲜重，g。
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β-1,3 葡聚糖酶（β-1,3-GA）活性检测试剂盒
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