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- 国产
- 2026年01月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
EPI300
- 保质期：
2-3年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
- 规格：
0.3mL甘油菌
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
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文献和实验一步实现单拷贝到高拷贝的转换－－Copy Control克隆技术（附图）
表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 二、CopyControl克隆和克隆诱导步骤（图2）： 图1 图2 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞（TransforMax EPI300
一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术
1 CopyControl 克隆 和 克隆 诱导步骤（图2）： 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培养基上筛选。在这种条件下，trfA基因的表达被抑制， 克隆 以单拷贝数量生长。 挑选 克隆
【共享】CopyControl克隆技术：一步法实现单拷贝到高拷贝
E.coli.这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。CopyControl克隆和克隆诱导步骤：将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。转化感受态细胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培养基上筛选。在这种
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