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上海研匠生物
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外泌体粒径检测-NTA
一、技术简介
NTA是利用光散射和布朗运动的特性获得悬浮液中样本粒度分布的检测方法。检测中通过光学显微镜，可直接观察纳米颗粒，收集纳米颗粒的散射光信号，跟踪其布朗运动轨迹，对复杂样品具有极高的分辨率。
该方法能保证外泌体原始状态，检测速度快、检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。粒径分析是从整体上对外泌体大小的分布情况进行检测，具有准确、快速、重复性好等优点，是对现有外泌体鉴定方法的良好补充。
本司采取通过Nanosight 可视型纳米颗粒分析仪确定外泌体颗粒数。
二、实验流程
1. 外泌体粒径检测。
2. 提供实验报告。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：外泌体（30 μl）或由我司分离得到外泌体。
2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期：3个工作日。
更多实验可点击下方链接：
外泌体提取实验：https://www.biomart.cn/infosupply/110578269.htm
外泌体鉴定实验：https://www.biomart.cn/infosupply/110564279.htm
外泌体检测NTA实验：https://www.biomart.cn/infosupply/95676015.htm
外泌体检测电镜实验：https://www.biomart.cn/infosupply/95676019.htm
外泌体蛋白质组学实验：https://www.biomart.cn/infosupply/110568960.htm
外泌体转录组，microRNA和lncRNA组学实验：https://www.biomart.cn/infosupply/110568892.htm
外泌体WB鉴定 https://www.biomart.cn/infosupply/95676009.htm
外泌体红色荧光（PKH26）标记试剂盒：https://www.biomart.cn/infosupply/110585349.htm
无外泌体胎牛血清：https://www.biomart.cn/infosupply/110567221.htm
无外泌体完全培养基：https://www.biomart.cn/infosupply/110585351.htm
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文献和实验2]JOURNAL OF EXTRACELLULAR VESICLES 2020,VOL.91722433
3]Zhu, Q; Ling, X; Yang, Y; et al.Embryonic Stem Cells-Derived Exosomes Endowed with Targeting Properties as Chemotherapeutics Delivery Vehicles for Glioblastoma Therapy.[J].Adv Sci (Weinh).2019,6(6):180189
4]Chang, CJ; Zhang, J; Tsai, YL; et al.Compositional Features of Distinct Microbiota Base on Serum Extracellular Vesicle Metagenomics Analysis in Moderate to Severe Psoriasis Patients.[J].Cells.2021,10(9):
5]Zhang Ye,Wu Yuan,Luo Shihua,et al.DNA Nanowire Guided-Catalyzed Hairpin Assembly Nanoprobe for In Situ Profiling of Circulating Extracellular Vesicle-Associated MicroRNAs.ACS sensors.2022;7 (4)：1075-1085.doi:10.1021/acssensors.1c02717
6]Gandham, S; Su, X; Wood, J; et al.Technologies and Standardization in Research on Extracellular Vesicles.[J].Trends Biotechnol.2020,38(10):1066-1098
细胞等）中外泌体含量比较低，加了 ECS 液离心之后肉眼无法观察到沉淀，在重悬时使用 PBS 需要仔细吹打离心管壁四周和底部（避免剧烈吹打）。针对提取后的外泌体应先进行 NTA 粒径检测或 BCA 蛋白定量检测，再决定是否进行后继实验。 10、在纯化过程中，EPF 柱为什么会出现堵塞现象？ 可能是因为细胞培养时间过长产生较多细胞碎片（样品离心预处理时不充分，仍有杂质残留）所致。若杂质残留较多（肉眼可见），请将上清液转移至新离心管，10,000 g，10 min离心 2-3 次至无明显沉淀，每次离心收集
？ 外泌体分离之后，需要经过一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。鉴定方法从物理特征到表面分子标志物，多角度进行鉴定。下面介绍几种鉴定方法： 透射电镜鉴定法：透射电镜，全称为透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，简称 TEM），分辨率为 0.1~0.2 nm，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，用于鉴定样本中是否存在外泌体样结构，即通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。 图四 外泌体电镜图 浓度粒径检测法：纳米颗粒跟踪分析法，简称 NTA（Nanoparticle
从脑组织中分离外泌体的方法。本文主要和大家分享我们从小鼠脑组织中分离外泌体的效果，供大家参考： 一、采用消化+超离法从脑组织中分离外泌体： 将脑组织剪成薄片，放入离心管中加上消化液进行消化，经水浴、反复轻轻上下颠倒，再用移液枪间断缓慢吹吸至消化结束。随后加入培养基于消化液中，混匀，置于冰上。再进行一系列的差速超速离心过程，包括除杂、滤膜过滤、超离等。最后用 PBS 重悬外泌体，用重悬后的外泌体进行下面的透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分子（NTA）和 marker WB
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