高架十字迷宫实验

高架十字迷宫

高架十字迷宫实验（EPM）是经典测量焦虑反应的方法，被广泛应用于新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科，也是医学院校与科研机构开展行为学研究尤其是焦虑抑郁研究的经典实验。

实验原理：

高架十字迷宫实验的原理是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐惧心理, 形成动物的矛盾冲突来考察动物的焦虑状态。

实验仪器 ：

高架十字迷宫主要由两条开臂和两条闭臂组成，互相垂直呈十字交叉，仪器上方装有动物行为实验专用的监控摄像机，通过采集卡连接电脑中对动物行为分析的软件。
 

实验步骤

1、实验之前，一定要确保高架十字迷宫整个装置的清洁。

2、让实验动物（大鼠或者小鼠）首先适应环境至少3H左右, 减少动物紧张。

3、将实验动物从饲养笼中取出，实验动物尽量背向实验员，将动物轻轻放在仪器宫体的中央区域，动物面向开臂，然后实验员迅速安静的离开；

4、打开动物行为分析软件，跟踪动物在高架十字迷宫仪器内的轨迹运动，自动计算指标，通常实验时长为5min；

5、实验结束后，取出实验动物，放入饲养笼，做好实验完成动物的标记信息，同时，用酒精和纸巾清洁迷宫。

实验指标 

1、进入开放臂次数（open arm entry，OE）：进入到任一开放臂的次数，以动物的四肢均进入臂内为准或者以动物身体80%进入臂内为准。

2、开臂活动（open arm time，OT）：动物四肢全部进入或者身体80%进入开臂内的持续时间，单位：秒。

3、进入闭臂次数（closed  arm  entry，CE）:进入到任一闭臂的次数，以动物的四肢均进入臂内为准或者以动物身体80%进入臂内为准。

4、闭臂活动（closed arm time，CT）：动物四肢全部进入或者身体80%进入闭臂内的持续时间，单位：秒。

5、向下探究次数（head-dipping）：实验动物置身于中央区域或者开臂时，一边用前爪握住迷宫边缘一边把头部和肩部伸出开臂的边缘向迷宫下面探究的行为次数。

6、闭臂后腿直立次数（rearing）：也叫闭臂支撑性站立，动物在闭臂前腿抬起以后腿支持身体直立的次数。

7、中央区域活动：中央区域指的是开臂和闭臂链接交叉的区域，实验动物在这个区域内的活动路程和滞留时间。

OE%和OT%：直接反映动物的焦虑水平。焦虑动物的 OE%和OT%会明显降低, 经典抗焦虑药物则使两者升高；

OE+CE：反映了动物的运动活性。一般情况下OE% 和 OT% 显著下降, 运动活性也降低。

 

注意事项 

1、实验开始时, 实验者需要手持小鼠使其背对实验者放置在开臂与闭臂的接合处, 且让小 鼠面对开臂若面对闭臂, 实验结果将受很大影响, 且同一实验中所有小鼠均需要面对同一开臂 , 否则可能会产生数据偏差。

2、其他一些可能影响实验结果的事项包括小鼠的年龄、性别、营养及健康状态、小鼠对环境的适应、实验条件基本保持一致实验时间段、固定的实验者等。

3、如果在实验中偶尔小鼠会从上掉落, 这时实验者需要立即将小鼠从地上抓起放回迷宫并将该事件记录下来, 最后在数据处理过程中留意此意外对结果产生的差异。

4、迷宫宫体距离地面的高度不宜过高或者过低，根据实验动物的大小确定。

5、可以选择一些白色或者黑色的吸水纸铺在迷宫底部，对于实验效率以及除味效果上面，更加合适。

6、务必提前至少3小时，将实验动物放在实验室适应，减少动物对新环境的不安情绪。