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杭州景杰生物科技股份有限公司
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蛋白质相互作用谱分析
蛋白质相互作用谱分析
服务简介
通过液质联用技术(LC-MS/MS)对IP、Co-IP、Pull-down等纯化样本中的蛋白混合物进行鉴定,可同时鉴定目的蛋白及其相互作用蛋白,从而构建与目的蛋白的蛋白质相互作用谱。该技术既适用于蛋白混合物的SDS-PAGE分离后经胶内酶解(in-gel digestion)的质谱分析,也适用蛋白混合物溶液内直接酶解(in-solution digestion)的质谱分析。
技术原理

仪器设备
Thermo Scientific Orbitrap Astral
Bruker timsTOF Pro2/HT
Thermo Scientific Q Exactive HF-X
Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
Thermo Scientific Q Exactive Plus
Thermo Scientific Orbitrap Fusion
Thermo Scientific Q Exactive
技术优势
适合IP、Co-IP、Pull-down蛋白质混合物样品鉴定;
高灵敏度质谱分析有效鉴定低丰度蛋白;
高准确性、高特异性、项目周期短。
应用领域
目的蛋白鉴定、蛋白混合物鉴定、蛋白质相互作用谱鉴定
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文献和实验一、引言 在许多的细胞生命活动中,例如 DNA 复制、mRNA 转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用的问题。 重组 DNA 技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要: 1. 鉴定分析参与基因表达调控的 DNA 元件。 2. 分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子。 这些问题的研究都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用。 研究 DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括
研究应用|使用 NanoBiT 技术进行的蛋白质相互作用细胞内定位成像
NanoBiT 是一种结构互补报告分子系统,可用于 PPI 的细胞内检测。它已成功应用于药物筛选、信号传导分析和病毒感染机制分析等一系列研究领域。该系统由一个大型 BiT(LgBiT;17.6 kDa)和一个小型 BiT(SmBiT;11 个氨基酸)亚基组成,它们将与目标蛋白质融合。这些亚基随后在细胞中表达,因此只有靶向 PPI 才能使这些亚基形成功能酶,从而产生明亮的发光信号(图 1)。 图 1. NanoBiT 蛋白质相互作用系统概览(图像 Promega 提供) 1.
相当多的蛋白质行使功能的时候并不是单打独斗的,蛋白质们通过蛋白质相互作用形成复合体然后进行工作,在工作的过程中,蛋白质们也可以通过更换相互作用的伙伴从而改变蛋白质复合体的功能。因此,研究蛋白质的相互作用成为研究蛋白质功能和作用机制的最为重要的环节之一。另外,蛋白质相互作用的本质其实是三种力,氢键,分子间作用力(范德华力)和疏水力,因为这三种力的作用距离都非常的短,所以相互作用的蛋白我们通常认为它们必定相互接近,尽管这是个充分非必要命题,但是我们常常使用这个命题的逆命题来进行实验检测
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