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上海达为科生物科技有限公司
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大鼠孔板实验
| 品牌 | 其他品牌 | 产地类别 | 国产 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,综合 |
孔板实验是Boissiex和Simon1962年次建立的,此后被广泛用于药效研究。该实验是利用新奇(curiosity)和恐惧(fear)两个因素来控制动物在新环境下的行为,用逃避(escapes) 来反映这两个因素的作用结果。
一、基本原理
孔板实验是Boissiex和Simon1962年次建立的,此后被广泛用于药效研究。该实验是利用新奇(curiosity)和恐惧(fear)两个因素来控制动物在新环境下的行为,用逃避(escapes) 来反映这两个因素的作用结果。动物反复钻头(head一dipping)反映其新奇感和对逃避的渴望。一般认为,药物在不影响动物运动活性的剂量下,增加钻头次数和时间,表现为抗焦虑作用,减少钻头次数和时间则为致焦虑作用。
二、操作步骤
大鼠和小鼠的实验装置有所不同。大鼠装置为一个66cm x 56cm x 47cm的木箱,底板有4个直径为3 . 8cm、深1 cm的等大圆孔,其中两孔离近壁14cm,另两孔17cm,孔板水平抬高12em;小鼠木箱为44cm x 40cm x 27cm , 4个孔的孔径均为3cm,厚1. 8cm,每孔中心离近壁的距离为l0cm。 80年代之后,孔板箱壁及每一孔周边都装有红外光电管,并与微机相联,这样可同时自动记录动物的钻头次数和钻头时间、运动活性及站立数等多项指标,既提高了工作效率,又增加了实验的可靠性。实验用雄性成年的大鼠或小鼠。将动物置于孔板中央,背朝观察者。动物两眼消失在洞中为一次钻头(a head一dip),记录5-10min的钻头次数及钻头持续时间。
三、注意事项与评价
(1)对孔板箱的形状和大小没有统一的标准,但常采用方型,其边长在大鼠一般60cm,小鼠为40c m左右。
(2)孔的数量早期多为16孔,现在通常采用4孔板。
(3)动物在上午的钻头数往往比下午多。因此,应尽量在每天固定的时间内做实验。
(4)本实验对致焦虑药(如BDZ受体反相激动剂)引起探究性钻头的特异性降低结果较为一致,而某些缺乏抗焦虑作用的药物(如BDZ受体拮抗剂氟马西尼)反可使探究性钻头增加。故在筛选未知药物时应结合其它焦虑模型进行评价。
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文献和实验大鼠麻醉后仰卧位固定,阴囊正中纵形切口长约 1.0cm。逐层切开皮肤、肉膜及深部筋膜,挤压下腹部见双侧睾丸自腹腔下降至阴囊。轻微牵拉右侧睾丸,游离睾丸及精索,于外环口处离断并采用 1丝线双重结扎,完整切除右侧睾丸及附睾。同样方法切除左侧睾丸及附睾。检查创面无明显活动性出血后,关闭创面,3-0 可吸收线逐层缝合切口。
可信的动物实验结果不仅依赖于科学的实验设计,也依赖于标准化的实验动物饲养。饲养小鼠、大鼠必须使用垫料是因为啮齿动物更喜爱平整带垫料的笼底,而不是金属网笼底。垫料可以吸收尿液和粪便,方便清洁。对小鼠、大鼠来说,与垫料直接接触增加了它们表达天性的机会,如搜寻、挖掘、和筑巢。 现在国内很容易获得商品化合格的实验动物,但是由于质量、价格等原因,研究机构往往不容易获得合适的垫料。我国《实验动物环境及设施》标准(GBl4925-2010)规定:垫料的材质应符合动物健康和福利要求,应满足吸湿性好、尘埃
霸占一个培养箱,里面就放着他的几块96孔板);而对72h或者更长培养时间的实验,边缘效应一般很大,经常导致周围的一圈微孔不能使用。1 |- J( r3 n; ] L c# b* J9 f7 X& m 那么,我一直很想知道,边缘效应的原因是什么,在上述方法2的理念里,是因为蒸发效应 ,导致培养基里水分减少,渗透压等理化因素变化,影响细胞的生长,所以在周围加水增加湿度,可以减少边缘效应。在上述方法3的理念里,是因为温度不平衡 ,骤然把微孔板从室温放入37度,那么周边孔更早升温










