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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海抚生
- 规格:
50次
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
优越的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。
猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株抗体ELISA检测试剂盒 96/192/480
猪圆环病毒2型抗体ELISA检测试剂盒 96
口蹄疫病毒NS抗体单抗阻断ELISA试剂盒 96/192/480
牛口蹄疫病毒非结构蛋白抗体胶体金检测试剂盒 30小鼠血管紧张素转化酶(mouse ACE) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠雄激素结合蛋白(mouse ABP) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠促肾上腺皮质激素(mouse ACTH) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠Active Caspase-3 ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠Active Caspase-7 ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠Active Caspase-8 ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠激活素A(mouse Activin A) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠脂联素(mouse Adiponectin) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠抗线粒体抗体(mouse AMA) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠抗核抗体(mouse ANA) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠血管紧张素II(mouse ANG II) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠心钠素(mouse ANP) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠凋亡诱导因子(mouse AIF) ELISA 48T/96T 进口分装
转基因元件FMV35S启动子LAMP试剂盒小鼠抗利尿激素/血管加压素(mouse AVP/ADH)样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
注意事项:
1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。
2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。
3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。 5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
操作程序:
由您提供该实验中目的基因的相关资料(如:基因名称、序列等信息),我们共同探讨服务的可能性和技术路线;
商定服务收费、付款方式、服务期限等,并签定技术服务合同。
有您提供实验所需的足够量的实验样本(100mg组织或107个细胞),本公司不接受您提供的RNA样本 PCR所需引物/探针(如果用探针法),可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成(费用另计)。如果由您自己提供,必须是PAGE纯化的高质量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探针。
我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。
提供实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。
PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。 步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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文献和实验源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
或者不表达 [ 图 11.1 (a ) 和图 11.1 (b ) ]。虽然玉米 Ubil 启动子具有很高水平的本底表达,但依然受热激和胁迫的诱导 [64],而这种诱导性在大多数玉米 Ubil 启动子的转基因研究中并未被积极利用。玉米 Ubil 的热激元件已被鉴定,当采用豌豆凝集素启动子的一个碱性结构域/亮氨酸拉链因子结合位点替换 Ubil 的热激元件时,则会改变基因在种子内的表达分布,即表达由胚转向胚乳 [66]。其他一些泛素启动子在单子叶植物转化中也得到鉴定,包括从水稻中分离出的 RUBQ2
表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前,载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素: (1)复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 (2)抗生素抗性基因可以便于加以检测,如 Amp+ ,Kan+ (3)多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 (4) P/E 启动子/增强
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