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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海抚生
- 规格:
50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
ELk1(Ser383) 磷酸化细胞转录因子ELK1抗体
人AT丰富结合域1A(ARID1A)免疫试剂盒 ETV2 ETS相关蛋白71抗体
人Apelin 免疫试剂盒 EDA 外胚层发育不良蛋白1抗体
人Apelin 36(AP36)免疫试剂盒 ETV3L ETV3L蛋白抗体
人apelin 13(AP13)免疫试剂盒 EphB6 酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体
人apelin 12(AP12)免疫试剂盒 LPA1 溶血磷脂酸受体蛋白1抗体
人AP-5复合物β亚基(PP1030)免疫试剂盒 LPA2 溶血磷脂酸受体蛋白2抗体
人alpha突触核蛋白(淀粉样前体非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)免疫试剂盒 LPA3 溶血磷脂酸受体蛋白3抗体
人Alpha-D 生育酚/维生素E(Alpha-D TPL)免疫试剂盒 EDG6 内皮细胞的分化蛋白6抗体
人alpha-1能受体(ADRA1)IgG抗体免疫试剂盒 EXTL2 外生性骨疣样蛋白2抗体
人AFG3样蛋白2(AFG3L2)免疫试剂盒 phospho-EIF4EBP1 (Ser100) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
人Adropin(ENHO)免疫试剂盒 phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
人ADP-核糖基化因子5(ARF5)免疫试剂盒 ESM1 内皮细胞特异性分子1抗体
人ADP-核糖基化因子4(ARF4)免疫试剂盒 eIF3F 真核翻译起始因子3F抗体
人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)免疫试剂盒 eIF3H 真核翻译起始因子3H抗体
人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)免疫试剂盒 eIF4G 真核翻译起始因子4G抗体
人8异前列腺素(8-iso-PG)免疫试剂盒 eIF6 β4整合素结合蛋白抗体
人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)免疫试剂盒 ECRG4 食道癌相关基因4蛋白抗体
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫试剂盒 EPO 红细胞生成素抗体
人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)免疫试剂盒 EPHX2 胞浆环氧化物水解酶抗体
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒 Estrogen Related Receptor gamma 雌激素受体相关蛋白3抗体
人6酮前列腺素(6-K-PG)免疫试剂盒 Estrogen Related Receptor beta 雌激素相关受体β抗体
人6-羟多巴胺(6-OHDA)免疫试剂盒 EMP2 上皮细胞膜蛋白2抗体
人60S核糖体蛋白L36a-样(RPL36AL)免疫试剂盒 ERG25 甲基固醇羟化酶单加氧酶1抗体
转基因元件E9’终止子PCR试剂盒人60S核糖体蛋白L17(RPL17)免疫试剂盒 EST1A 端粒酶结合蛋白EST1A抗体
人5-羟色胺受体6(HTR6)免疫试剂盒 EZH1 组蛋白赖氨酸N-甲基EZH1抗体
人5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗体(IgM)免疫试剂盒 Epithelial Stromal Interaction 1 上皮间质相互作用蛋白1抗体
人5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗体(IgG)免疫试剂盒 EIG121 雌激素诱导基因121蛋白抗体
人5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗体(IgA)免疫试剂盒 Endomucin 内皮粘蛋白EMCN抗体
人5羟色胺(5-HT)免疫试剂盒 EBP50 细胞骨架连接质膜蛋白抗体使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
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文献和实验源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
转录所需要的全部元件。 8、Pol III 终止子 Pol III终止子( Pol III terminator);4个或者更多个T,提供Pol III依赖的转录终止。 9、U6 启动子 U6 启动子(U6 promoter)一种pol III型启动子,允许产生确定末端的小RNA(参看pol III启动子)。 10、入门载体 (entry vector) 包含attL位点,用来克隆DNA片段的Gateway®载体。U6入门载体, pENTR®/U6,专门设计使用U6 pol
),通常用来驱动shRNA的产生。PolIII启动子具有在某一确定起始位点上游启动转录所需要的全部元件。PolIII终止子PolIII终止子(PolIIIterminator);4个或者更多个T,提供PolIII依赖的转录终止。U6启动子U6启动子(U6promoter)一种polIII型启动子,允许产生确定末端的小RNA(参看polIII启动子)。入门载体(entryvector)包含attL位点,用来克隆DNA片段的Gateway®载体。U6入门载体,pENTR®/U6,专门设计使用U6
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