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- FS-P99218
- 2025年07月14日
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低温冷藏
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详见说明书
- 英文名：
详见说明书
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100
- 供应商：
上海抚生
- 规格：
50次
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
牛白介素10(IL-10)免疫试剂盒 FAM129B FAM129B蛋白抗体
牛白介素1(IL-1)免疫试剂盒 RMD2 微管动力调节蛋白2抗体
牛γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒 FAM50A FAM50A蛋白抗体
转基因元件atsIA启动子LAMP试剂盒牛γ氨基丁酸(GABA)免疫试剂盒 FAM113A FAM113A蛋白抗体
牛β-乳球蛋白(β-LG)(过敏原Bosd5)(LGB)免疫试剂盒 FAM150A FAM150A蛋白抗体
牛β羟基丁酸脱氢酶(β-HBDH)免疫试剂盒 FRMD8 FRMD8蛋白抗体
牛β羟丁酸(βOHB)免疫试剂盒 FGFR1OP FGFR1癌基因伴侣蛋白抗体
牛β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒 FAM40A FAM家族蛋白40A抗体
牛β干扰素(IFN-β/IFNB)免疫试剂盒 FAM55D FAM55D蛋白抗体
牛β-防御素(β-Defensins)免疫试剂盒 FAM120B 组织激活过氧化酶活化增生受体γ蛋白抗体
牛α乳清蛋白(α-La)免疫试剂盒 FAM21C FAM21C蛋白抗体
牛α晶体B链(CRYAB)免疫试剂盒 FAM13C1 FAM13C1蛋白抗体
牛α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒 FAM59B FAM59B蛋白抗体
牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒 FAM59A FAM59A蛋白抗体
牛P物质(SP)免疫试剂盒 FAM160B1 FAM160B1蛋白抗体
牛N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫试剂盒 FAM161B FAM161B蛋白抗体
牛N端前脑钠素(NT-proBNP)免疫试剂盒 FAM151A FAM151A蛋白抗体
牛D-乳酸免疫试剂盒 FAM156A 跨膜蛋白29抗体
牛C肽(C-Peptide)免疫试剂盒 FAM154A FAM154A蛋白抗体
牛C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒 FAM155A FAM155A蛋白抗体
牛5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)免疫试剂盒 FAM164B FAM164B蛋白抗体
牛Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)免疫试剂盒 FRMD3 FRMD3蛋白抗体
牛1-磷脂酰肌醇-4,5 - 二磷酸磷酸二酯酶ζ1(PLCZ1)免疫试剂盒 FRMD4B FRMD4B蛋白抗体
牛17羟孕酮(17-OHP)免疫试剂盒 FRMD7 FRMD7蛋白抗体
牛1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒 FRMD4A FRMD4A蛋白抗体
绵羊ELISA试剂盒 FAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗体
绵羊组胺(HIS)免疫试剂盒 FAM101A FAM101A蛋白抗体
绵羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒 FAM102B FAM102B蛋白抗体检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增，提升了扩增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板，在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性，检测灵敏度更高。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定 先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
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文献和实验很耗时间； 2) 区域或者组织特异性不高：因为转基因小鼠依赖的基因敲除的特异性只能依赖于启动子的调控，而有些启动子并不能完全符合科研工作者对于区域或者组织特异性的要求，这样就会使实验结果不精确。 1.病毒依赖的基因重组 由于转基因动物依赖的基因重组存在以上不足，现在越来越多的科研工作者开始采用比较灵活的方式使用Cre-loxP系统。通过病毒引入Cre或loxP元件，结合一种转基因小鼠是比较常用的方式（图3）。相比于转基因动物依赖的基因重组，病毒依赖的基因重组有以下优点： 1) 更强
或S1作图精确定位TSS 引物延伸及s1核酸酶 保护 2)启动子区域(顺式作用元件)的确定 a)生物信息 学预测启动子区域 b)克隆5’-flanking sequence，并连接到报告基因 载体中 c)缺失、突变 d)荧光素酶活性分析 e)确定转录调控区域(启动子区域) 3)转录因子(反式作用元件)结合位点的确定 a)生物信息学预测转录因子结合位点 b)实验证实转录
源序列，这些序列通常不存在于野生型植物中。其中，这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来，则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测，逐渐成为科学家们关注的焦点。目前，已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列，选择退火位点生成单一DNA片段，以便于结果的分析。PCR反应
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